[지재 판결문] 특허법원 2022허4796 - 등록무효(특)

 

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- 1 -

특 허 법 원

제 부

판 결

사 건 허 등록무효 특2022 4796 ( )

원 고 주식회사 A

대표이사 B

소송대리인 법무법인 유한 화우( )

담당변호사 이민걸 권동주 김창권 최정환, , ,

소송대리인 특허법인 에이아이피

담당변리사 이수완 조진태 이재웅 윤종섭 이성규 김희경, , , , , ,

정현수

피 고 주식회사 C

대표이사 D

소송대리인 특허법인 공간

담당변리사 백경업

변 론 종 결 2023. 7. 11.

판 결 선 고 2023. 11. 23.

- 2 -

주 문

1. 원고의 청구를 기각한다.

2. 소송비용은 원고가 부담한다.

청 구 취 지

특허심판원이 당 호 사건에 관하여 한 심결을 취소한다2022. 8. 1. 2021 1647 .

이 유

기초사실1.

가 피고의 이 사건 특허발명 갑 제 호증 . ( 2 )

발명의 명칭 다물린 에이 및 다물린 비 함량이 증가된 신규 돌외추출물의 제조 1) :

방법 및 이를 이용한 대사질환 치료용 약학 조성물

출원일 등록일 등록번호 특허 제 호 2) / / : 2009. 7. 17. / 2009. 12. 1. / 930580

청구범위 3)

청구항 돌외잎 에탄올 추출물 농축액을 기압 시간 1 100~125 , 1.2~690 , 0.5~24【 】 ℃

동안 또는 기압 시간 동안 고온고압반응 처리하여 돌외잎 45~100 , 690~1100 , 12~24 , ℃

추출물 농축액 건조분말의 다물린 함량이 다물린 의 함량이 A 0.7~7%(w/w), B 0.5~6%

로 증가된 돌외추출물의 제조방법 이하 이 사건 제 항 발명이라 하고 나머지 (w/w) ( ‘ 1 ’ ,

청구항도 같은 방식으로 부른다).

청구항 돌외잎 에탄올 추출물 농축액을 기압 시간 2 100~125 , 1.2~690 , 0.5~24【 】 ℃

동안 또는 기압 시간 동안 고온고압반응 처리하여 제조되는 45~100 , 690~1100 , 12~24℃

- 3 -

것으로서 다물린 는 이고 다물린 는 를 유효성분으로 포, A 0.7~7%(w/w) B 0.5~6%(w/w)

함되는 것을 특징으로 하는 비만 당뇨 또는 고지혈증의 개선 및 치료용 돌외추출물, .

청구항 제 항의 돌외추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 비만 당뇨 또는 3 2 , 【 】

고지혈증의 개선용 기능식품.

청구항 제 항에 있어서 상기 기능식품은 온천수 여과수 증류수 탄산수 주 4 3 , , , , , 【 】

스 요구르트 우유 식용유의 매개질을 포함하는 것을 특징으로 하는 기능식품, , , .

청구항 제 항의 돌외추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 비만 당뇨 또는 5 2 , 【 】

고지혈증의 개선 및 치료용 약학 조성물.

청구항 제 항에 있어서 상기 약학 조성물은 6 5 , AMP-activated protein kinase 【 】

효소의 활성을 증가시키는 것을 특징으로 하는 비만 당뇨 또는 고지혈증의 (AMPK) ,

개선 및 치료용 약학 조성물.

청구항 하기 화학 구조식의 다물린 또는 다물린 의 화합물 중 하나 이상 7 A B【 】

을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 비만 당뇨 또는 고지혈증의 개선 및 ,

치료용 약학 조성물.

청구항 제 항에 있어서 상기 약학 조성물은 8 7 , AMP-activated protein kinase 【 】

효소의 활성을 증가시키는 것을 특징으로 하는 비만 당뇨 또는 고지혈증의 (AMPK) ,

개선 및 치료용 약학 조성물.

[화학 구조식]

Damulin A Damulin B

- 4 -

이 사건 특허발명의 주요 내용은 별지 과 같다 4) [ 1] .

나 선행발명들 .

선행발명 은 공개특허공보 제 호로 공개된 인슐린 1) 1 2008. 1. 8. 10-2008-0003931 “

저항성 증후군 치료 에 관한 발명으로 주요 내용은 별지 의 과 같다 갑 제 호증” , [ 2] 1 ( 4 ).

선행발명 는 년 월 한국실험동물학회 학술발표대회 논문집에 실린 비만 2) 2 2005 11 “

및 당뇨모델을 이용한 비만억제 및 항당뇨 기능성 신물질의 개발 이라는 국문 제목이 ”

붙은 영문 발표 자료로 주요 내용은 별지 의 와 같다 갑 제 호증, [ 2] 2 ( 5 ).

선행발명 은 제품 홍보용 브로슈어로 은 돌외추출물인 성분이 3) 3 E , ‘E TG1022

를 활성화시켜 지방 합성을 억제하고 체지방을 연소하는 효과가 우수하며 간이AMPK ,

임상시험에서 매주 씩 주간 복용 시 평균 허리둘레 감소 평240~300 7~24 5.4~5.8 , ㎎ ㎝

균 체중감소 효과를 보였다고 기재하고 있다 갑 제 호증3.3~2.1 ’ ( 6 ).㎏ 1)

선행발명 는 공개되고 특허 제 호로 등록된 4) 4 1997. 1. 21. 1999. 1. 29. 192678

약효가 증강된 가공인삼 제품 에 관한 발명이다 갑 제 호증 그 명세서는 고지혈증 “ ” ( 7 ). ‘

개선 등 약효를 갖는 인삼 즉 수삼이나 백삼 미삼 또는 이들의 추출물을 일반 홍삼의 , ,

제조온도 보다 훨씬 높은 에서 가열처리하면 인삼이나 홍삼에는 (98~100 ) 120~180℃ ℃

존재하지 않거나 단지 미량으로만 존재하던 성분들의 함량이 크게 증가할 뿐만 아니라

새로운 성분이 생성되어 약효가 크게 증가함을 개시하고 있고 쪽 에서 시간 ’ (2-5 , 120 4℃

동안 가열하는 실험례가 있음 진세노이드 의 합이 의 합), ‘ Rg3, Rg5 Rb1, Rb2, Rc, Rd

1) 미국특허출원 출원일이 로 확인된다 식약청 건강기능식품 개별인증 허가 신청 “ No. 11/380,472”( 2006. 4. 27. ), “
계획 년 월 이라는 기재 등에 비추어 이 사건 특허발명 출원일 전에 공지된 자료라고 인정된다 피고는 (2008 11 )” , .
위 브로슈어는 사내교육용 자료여서 공지된 자료에 해당하지 아니한다고 주장하고 갑 제 호증에 사내교육용‘ ’ , 6 “ ”
이라는 기재가 있기는 하나 소비자상담실 전화번호가 기재되어 있는 등 일반 소비자들에게 홍보 판매할 목적, ․
으로 제작된 자료를 사내교육에도 쓴 것이라고 보이는 점 교육받은 직원들에게 그 내용에 관한 비밀준수의무가 ,
있다고 볼 자료가 없는 점 등에 비추어 선행발명으로 인정할 수 있다, .

- 5 -

보다 큰 가공인삼 제품이 얻어져 고혈압 당뇨병 등 [(Rg3+Rg5)/(Rb1+Rb2+Rc+Rd) 1] , ≥

질환의 예방 또는 치료제로 사용될 수 있을 것임을 시사하고 있다’ .

선행발명 는 년 월 공개된 돌외 사포닌 로부터 인삼사포닌 5) 5 2009 2 “ Gypenoside V

의 생산 이라는 제목의 경희대학교 대학원 한방재료가공학과 석사학위논문으로 그 C-K ” ,

주요 내용은 별지 의 과 같다 갑 제 호증[ 2] 3 ( 8 ).

선행발명 은 공개특허공보 제 호로 공개된 담마 6) 6 2007. 11. 15. 10-2007-0109282 “

란2)계 화합물을 유효성분으로 포함하는 신장 보호용 약학 조성물 에 관한 발명으로” ,

주요 내용은 별지 의 와 같다 갑 제 호증 특허 제 호로 등록[ 2] 4 ( 25 , 2008. 4. 30. 828192 ).

다 분쟁 경과 .

원고는 특허심판원에 피고를 상대로 이 사건 특허발명의 등록무효 1) 2013. 12. 10.

심판을 청구하였으나 특허심판원은 원고의 심판청구를 기각하는 심결을 , 2014. 12. 30.

하였다 당 이에 불복하여 원고가 위 심결 취소를 구하는 소를 제기하였으나(2013 3241). ,

특허법원에서 원고의 청구가 기각되고 허 대법원에서 2015. 9. 24. (2015 741), 2018. 6.

상고가 기각되어 후 위 심결이 그대로 확정되었다15. (2015 1874) .

원고는 피고를 상대로 2) 2013. 12. 10. ‘돌외잎을 물에 침지 한 후 에탄올을 ( )浸漬

용매로 이용하여 침지된 돌외잎을 두 차례에 걸쳐 추출하여 제조한 가이페노사이드 ,

등 여러 종류의 담마란계 사포닌과 다물린 를 포함한 에탄올 추출물을 유효성분으로 A

포함하는 비만 개선용 식품에 관하여 ’ 소극적 권리범위확인심판을 피고는 , 2014. 4. 30.

원고를 상대로 ‘돌외잎 주정 에탄올 추출물 농축액을 에서 시간 동안 고온고압 ( ) 121 4℃

처리하여 제조된 다물린 중량 다물린 중량 를 함유한 돌외, A 0.96~1.44 %, B 0.82~1.22 %

2) 이 일부 선행발명에서 다마란 으로 쓰여 있으나 이하 담마란 으로 통일하여 적는다 “dammarane” “ ” , “ ” .

- 6 -

잎 주정 추출 분말로서 체지방 감소에 도움을 주는 비만 개선용 식품원료에 관하여 ’

적극적 권리범위확인심판을 각 청구하였고 특허심판원은 원고 심판청구, 2014. 12. 30.

는 기각하고 피고 심판청구는 인용하는 각 심결을 하였다, 당 당(2013 3242, 2014 1010).

이에 불복하여 원고가 각 심결의 취소를 구하는 소를 제기하였고 특허법원은 , 2015. 9.

소극적 권리범위확인심판 사건 심결은 취소하고 적극적 권리범위확인심판에 관한 24. ,

원고의 청구는 기각하는 각 판결을 하였다 허 허 원고가 청구기각 (2015 758, 2015 765).

판결에 대해 상고하였으나 대법원에서 상고가 기각되었다 후, 2018. 6. 15. (2015 1881).

피고는 원고가 년경부터 년경까지 생산한 원고 제품 3) 2014. 4. 16. ‘ 2013 2016 돌외[

잎 주정 추출물 농축액을 에서 시간 동안 고온고압 처리하여 제조된 다물린 121 4 , A℃

를 중량 의 다물린 를 중량 의 함유0.96~1.44 %(1.2% ±20%), B 0.82~1.22 %(1.02% ±20%)

하는 돌외잎 주정 추출 분말로서 체지방 감소에 도움을 주는 비만 개선용 식품원료]이

이 사건 제 항 발명에 관한 피고의 특허권을 침해하였다고 주장하면서 원고 제품의 1 ’

생산 사용 판매 등 금지를 구하는 가처분을 신청했고 법원은 위 신청을 , , , 2015. 7. 2.

인용하는 가처분결정을 하였다 수원지방법원 안산지원 카합 원고가 이의했( 2014 10025).

으나 위 법원은 가처분결정을 인가하였고 카합 원고가 다시 2015. 10. 13. (2015 10052),

항고하였으나 서울고등법원에서 항고가 기각되었다 라2016. 11. 4. (2015 20825).

피고는 대구지방법원에 원고를 상대로 이 사건 제 항 발명에 관한 4) 2015. 10. 16. 1

특허권 침해를 이유로 원고 제품 생산 금지 등과 손해배상을 구하는 소를 제기하였고,

위 법원은 피고의 금지청구 등을 인용하면서 원고에게 손해배상으로 억 2018. 8. 30. 4

여만 원 및 지연손해금 지급을 명하는 판결을 하였다 가합 항소심인 5,700 (2015 206601).

특허법원은 피고의 금지청구 등을 인용하는 한편 원고에게 손해배상금 2021. 7. 22.

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억 원 및 지연손해금 지급을 명하는 판결을 하였고 나 대법원은 15 (2018 2070), 2021. 12.

손해배상채무에 대한 지연손해금률을 상법상 가 아니라 민법상 만 인정하는 30. 6% 5%

것으로 자판하는 외에는 쌍방의 상고를 모두 기각하는 판결을 하였다 다(2021 264659).

한편 원고는 위 의 소가 제기되자 특허심판원에 피고를 상대로 5) 4) , 2015. 10. 30.

돌외잎을 물에 침지하고 에서 시간 동안 차 추출하고 차 추출된 돌‘ 121 1~8 1 , 1㉠ ℃ ㉡

외잎을 에서 에탄올 용매로 시간 동안 차 추출하고 차 추출액을 80 50% 1~8 2 , 1, 2℃ ㉢

농축 여과 및 원심분리 하는 방법으로 제조한( ) , 여러 담마란계 사포닌 물질 특히 다물,

린 다물린 가 각각 중량 범위인 A, B 0.2~3 % 돌외추출물을 유효성분으로 포함하는 비만

개선용 식품 건조분말 형태 에 관하여 소극적 권리범위확인심판을 청구했다 특허심판( )’ .

원은 원고의 심판청구 중 이 사건 제 항 발명에 관한 부분은 확인대상2019. 7. 12. 1, 2

발명 불특정을 이유로 각하하고 이 사건 제 항 발명에 관한 부분은 기각하는 심결을 , 7

하였다 당 원고는 위 심결의 취소를 구하는 소를 제기하였고 특허법원은 (2015 5113). ,

확인대상발명이 특정되었다 하여 심결 중 이 사건 제 항 발명에 관한 2020. 6. 4. 1, 2

부분은 취소하고 원고의 나머지 청구는 기각하는 판결을 하였다 허 원고가 (2019 5904).

위 청구기각 부분에 대해 상고하였으나 대법원은 심리불속행 상고 기각 , 2020. 10. 15.

판결을 하였다 후 특허심판원은 확인대상발명이 이 사건 제 항 (2020 10889). 2021. 6. 2. 1

발명의 권리범위에는 속하지 않고 이 사건 제 항 발명의 권리범위에는 속한다는 심결2

을 하였고 그 심결은 그대로 확정되었다 당 취소판결, [2020 ( )163].

원고 사내이사였던 는 주식회사 이하 이라 한다 을 설립하였 6) F 2017. 4. 5. G( ‘G’ )

다 은 특허심판원에 피고를 상대로 이 사건 특허발명의 등록무효심판을 . G 2017. 8. 4.

청구했으나 특허심판원은 의 심판청구를 기각하는 심결을 하였다 당, 2018. 8. 6. G (2017

- 8 -

이에 불복하여 이 위 심결 취소를 구하는 소를 제기하였으나 특허법원에서 2462). G ,

의 청구가 기각되고 허 대법원이 심리불속행 2019. 11. 22. G (2018 7668), 2020. 3. 26.

상고 기각 판결을 하여 후 위 심결이 그대로 확정되었다(2019 12087) .

라 이 사건 심결 경위 .

원고는 이 사건 제 내지 항 발명은 신규성이 부정될 뿐만 아니라 2021. 5. 28. ‘ 2 8

기재가 명확하지 않고 이 사건 제 내지 항 발명은 진보성이 부정된다고 주장하면서 , 1 8 ’

이 사건 특허발명에 대한 등록무효심판을 청구하였고 특허심판원은 원고 , 2022. 8. 1.

심판청구를 기각하는 이 사건 심결을 하였다 당(2021 1647).

인정근거[ ] 다툼 없는 사실 갑 제 내지 호증의 각 기재 이 법원에 , 1 8, 25, 50, 51, 52 ,

현저한 사실 변론 전체 취지,

당사자 주장의 요지2.

가 원고 .

㉮ 이 사건 제 내지 항 발명은 선행발명 또는 에 의해 신규성이 부정되고2 8 , 1 6 ,

선행발명 선행발명 의 결합 선행발명 선행발명 과 의 결합 선행발명 1, 1, 2, 3 , 6, 1 6 ,

의 결합 선행발명 내지 의 결합에 의하여 진보성이 부정되며 청구범위가 1, 4, 5 , 1 5 ,

불명확하다 이 사건 제 항 발명도 선행발명 의 결합 선행발명 내지 의 . 1 1, 4, 5 , 1 5㉯

결합에 의하여 진보성이 부정된다 이 사건 제 항 발명은 발명의 성립성이 부정. 7, 8㉰

되고 약리효과가 명확히 기재되어 있지 않다 이 사건 특허발명의 등록은 무효이므로, . ,

이와 결론을 달리한 이 사건 심결은 위법하여 취소되어야 한다.

나 피고 .

이 사건 특허발명에 관하여 등록무효심판이 두 번 있었고 그 심판청구를 기각하는 ,

- 9 -

각 심결이 확정되었다 앞의 의 다 및 원고는 동일한 사실과 증거에 의하여 [ 1. . 1) 6)].

다시 심판을 청구하였으므로 특허심판원은 특허법 제 조에 따라 이 사건 심판청구를 163

각하했어야 한다 이 사건 특허발명에 원고 주장과 같은 등록무효 사유도 없다. .

이 사건 심결의 일사부재리 원칙 위반 여부3.

가 관련 법리 .

특허 등록무효심판청구에 관하여 종전에 확정된 심결이 있더라도 종전 심판에서 1)

청구원인이 된 무효사유 외에 다른 무효사유가 추가된 경우에는 새로운 심판청구는 그

자체로 동일사실에 의한 것이 아니어서 일사부재리 원칙에 위배되지 아니한다 그러나 .

모순 저촉되는 복수의 심결이 발생하는 것을 방지하려는 일사부재리 제도의 취지를 ․

고려하면 위와 같은 경우에도 종전에 확정된 심결에서 판단이 이루어진 청구원인과 ,

공통되는 부분에 대해서는 일사부재리 원칙의 관점에서 확정된 심결을 번복할 수 있을

정도로 유력한 증거가 새로이 제출되었는지를 따져 종전 심결에서와 다른 결론을 내릴

것인지를 판단하여야 한다 대법원 선고 후 전원합의체 판결 참조( 2017. 1. 19. 2013 37 ).

동일사실에 의한 동일한 심판청구에 대하여 전에 확정된 심결의 증거를 다르게 2)

해석하는 등 종전 심결의 기본이 된 이유와 실질적으로 저촉되는 판단을 하는 것은 특

허법 제 조가 정한 일사부재리 원칙의 취지에 비추어 허용되지 아니하나 전에 확정163 ,

된 심결의 증거를 그 심결에서 판단하지 않았던 사항에 관한 증거로 들어 판단하거나

그 증거의 선행기술을 확정된 심결의 결론을 번복할 만한 유력한 증거의 선행기술에

추가적 보충적으로 결합하여 판단하는 경우 등과 같이 후행 심판청구에 대한 판단 내,

용이 확정된 심결의 기본이 된 이유와 실질적으로 저촉된다고 할 수 없는 경우에는,

확정된 심결과 결론이 결과적으로 달라졌다고 하더라도 일사부재리 원칙에 반한다고

- 10 -

할 수 없다 대법원 선고 후 판결 참조( 2013. 9. 13. 2012 1057 ).

나 판단 .

갑 제 호증 을 제 호증의 각 기재 및 변론 전체 취지에 의하면 원고는 이 사건 36 , 8 ,

심판청구를 하면서 종전 심판에서 주장하지 않은 기재불비를 무효사유로 추가했고‘ ’ ,

전에는 선행발명 을 이 사건 특허발명의 진보성을 다투는 증거로 제출했으나 이 사건6

에서는 그로써 신규성을 다투고 있으며 전에 주장하지 아니하였던 새로운 선행발명 ,

결합관계를 들어 진보성을 다투고 있다.

원고의 이 사건 일부 주장은 확정된 심결의 결론을 번복할 수 있을 정도라고 보기

어려우나 위와 같이 이 사건에서 새로운 무효사유 주장이 추가된 점 등을 고려하여 ,

이하에서는 이 사건 심결이 일사부재리 원칙에 위배되지 아니함을 전제로 판단한다.

이 사건 제 내지 항 발명의 신규성 유무4. 2 8

가 관련 법리 .

1) 특허법 제 조 제 호에는 발명이 물건의 발명 방법의 발명 물건을 생산하는 2 3 ‘ ’, ‘ ’, ‘

방법의 발명으로 구분되어 있는바 청구범위가 전체적으로 물건으로 기재되어 있으면’ ,

서 제조방법 기재를 포함하고 있는 발명 이하 제조방법이 기재된 물건발명이라 한다( ‘ ’ )

은 제조방법이 기재되어 있다 하더라도 발명의 대상은 제조방법이 아니라 최종적으로

얻어지는 물건 자체이므로 위와 같은 발명의 유형 중 물건의 발명에 해당한다 물건‘ ’ .

발명에 관한 청구범위는 발명의 대상인 물건의 구성을 특정하는 방식으로 기재하여야

하므로 물건발명의 청구범위에 기재된 제조방법은 최종 생산물인 물건의 구조나 성질 ,

등을 특정하는 하나의 수단으로서 의미를 가질 뿐이다 따라서 제조방법이 기재된 물.

건발명의 특허요건을 판단할 때는 그 기술적 구성을 제조방법 자체로 한정하여 파악할

- 11 -

것이 아니라 제조방법 기재를 포함하여 청구범위의 모든 기재로 특정되는 구조나 성질

등을 가지는 물건으로 파악해 출원 전에 공지된 선행기술과 비교하여 신규성 진보성 ,

등이 있는지 살펴야 한다 대법원 선고 후 전원합의체 판결 참조( 2015. 1. 22. 2011 927 ).

물건발명에서 동일한 발명이 그 출원 전에 공지되었거나 공연히 실시되었음이 2)

인정되면 그 발명의 신규성은 부정된다 특허발명에서 구성요소로 특정된 물건의 구성.

이나 속성이 선행발명에 명시적으로 개시되어 있지 않은 경우라도 선행발명에 개시된

물건이 특허발명과 동일한 구성이나 속성을 갖는다는 점이 인정되면 이는 선행발명에 ,

내재된 구성 또는 속성으로 볼 수 있다 이와 같은 경우 특허발명이 해당 구성 또는 .

속성으로 인한 물질의 새로운 용도를 특허대상으로 한다는 등 특별한 사정이 없는 한

공지된 물건에 원래부터 존재하였던 내재된 구성 또는 속성을 발견한 것에 불과하므로

신규성이 부정된다 이것은 그 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 사람.

이하 통상의 기술자라 한다 이 출원 당시 그 구성이나 속성을 인식할 수 없었더라도 ( ‘ ’ )

마찬가지이다 공지된 물건의 내재된 구성 또는 속성을 파악하기 위하여 출원일 이후 .

공지된 자료를 증거로 사용할 수 있다.

한편 선행발명에 개시된 물건이 특허발명과 동일한 구성 또는 속성을 가질 수도

있다는 가능성이나 개연성만으로는 두 발명이 동일하다고 말할 수 없고 필연적으로 ,

그와 같은 구성 또는 속성을 가진다는 점이 증명되어야 한다 즉 선행발명이 공지된 . ,

물건 자체라면 그 물건과 특허발명의 구성을 대비하여 두 발명이 동일한지를 판단할

수 있으나 선행발명이 특정한 제조방법으로 제작한 물건에 관한 공지된 문헌이라면, ,

선행발명에 개시된 물건은 그에 개시된 제조방법에 따라 제조한 물건이므로 선행발명,

에 개시된 제조방법에 따랐을 경우 우연한 결과일 수도 있는 한 실시례가 위와 같은

- 12 -

구성 또는 속성을 가진다는 점을 넘어 그 결과물이 필연적으로 해당 구성 또는 속성을

가진다는 점이 증명되어야 선행발명과 특허발명이 동일하다고 할 수 있다 대법원 (

선고 후 판결 참조2021. 12. 30. 2017 1304 ).

특허법 제 조 제 항을 적용하기 위해 발명이 동일한지를 판단할 때는 두 발명 3) 29 1

의 기술적 구성이 동일한지에 따라 판단하되 효과도 참작하여야 한다 기술적 구성에 .

차이가 있더라도 과제 해결을 위한 구체적 수단에 있어서 주지관용기술을 부가 삭제, ,

변경하는 등으로 새로운 효과가 발생하지 않는 정도의 미세한 차이가 있는 것에 불과

하다면 두 발명은 서로 동일하다 대법원 선고 후 판결 참조( 2004. 10. 15. 2003 472 ).

나 이 사건 제 항 발명의 신규성 . 2

청구범위 해석 1)

가 이 사건 제 항 발명은 돌외추출물 즉 특허법 제 조 제 호 가목에서 말하는 ) 2 “ ”, 2 3

물건의 발명으로서‘ ’ , “돌외잎 에탄올 추출물 농축액을 기압100~125 , 1.2~690 , 0.5~24℃

시간 동안 또는 기압 시간 동안 고온고압반응 처리 한다는 45~100 , 690~1100 , 12~24 ”℃

제조방법 이하 구성요소 이라 한다 다물린 는 이고 다물린 는 ‘ ’( ‘ 2-1’ ), “ A 0.7~7%(w/w) B

를 유효성분으로 포함 한다는 조성 이하 구성요소 라 한다 비만0.5~6%(w/w) ” ‘ ’( ‘ 2-2’ ), “ ,

당뇨 또는 고지혈증 개선 및 치료용 이라는 용도 이하 구성요소 라 한다 에 관한 ” ‘ ’( ‘ 2-3’ )

기재를 포함하고 있다.

나 ) 구성요소 은 2-1 이 사건 제 항 발명의 최종 생산물인 돌외추출물의 구조와 2 ‘ ’

성질을 특정하는 요소라고 봄이 타당하다.

건강기능식품 기능성 원료 및 기준 규격 인정에 관한 규정 식품의약품안전처 (․

고시 제 호 에 따르면 추출물 은 동물 식물 미생물 물 등 기원의 원재2021-66 ) , “ ” “ , , , ( ) 水

- 13 -

료로부터 용매를 사용하거나 물리적으로 추출한 물질 제 조 제 항 제 호 나목 ”[ 2 1 1 (1)],

지표성분 은 원료 중에 함유되어 있는 화학적으로 규명된 성분 중에서 품질관리의 “ ” “

목적으로 정한 성분 을 말한다 같은 항 제 호” ( 3 ).3) 또한 한약 생약 제제 등의 품목허가 ( ) ․

신고에 관한 규정에 따르면 유효성분 이란 내재된 약리작용에 의하여 그 의약품의 , “ ” “

효능 효과를 직접 또는 간접적으로 발현한다고 기대되는 물질 또는 물질군 약리학적 (․

활성성분 등이 밝혀지지 아니한 생약 등을 포함한다 으로서 주성분 을 말한다 제 조 제) ” ( 2

호1 ).4) 그런데 생약이나 천연물 추출물에는 여러 성분이 포함되어 있어 함유된 화합물

의 구조와 특성을 모두 규명하는 것이 가능하지 않은 경우가 많고 각 성분과 활성 간,

의 상관관계가 명확하지 않은 경우도 많다.5) 이에 특정한 원재료 또는 제조방법으로

얻어낸 물질에만 특이적으로 존재하거나 그러한 물질에 특별히 많이 함유되어 있기 ‘ ’ ‘ ’

때문에 해당 물질을 다른 물질과 구별하는 기준이 될 수 있는 성분으로서 화학적으로

규명된 것을 지표성분으로 정하고‘ ’ ,6) 기능에 초점을 두어 의약품의 효능 효과를 ‘ ’ ․

직 간접적으로 발현한다고 기대되는 주성분인 물질 군 을 유효성분이라고 부르는 것( ) ‘ ’․

이다 지표성분이 반드시 유효성분인 것은 아니며 위에서 본 바와 같이 생약 등은 유. ,

효성분이 무엇인지가 명확하지 않을 때도 있다 오히려 생약 등의 약효는 거기에 함유. ,

3) 지표성분 의 정의는 개정 식품의약품안전청 고시 제 호에서도 같다 “ ” 2009. 6. 29. 2009-39 .
4) 제정 당시부터 현재까지 같다 .
5) 식품의약품안전처 식품의약품안전평가원 생약의 품질자료 작성 가이드라인 이하 가이드라인이라 한다 , , 2020( ‘ ’ ),

쪽 여기서 생약 이란 동 식물의 약용으로 하는 부분 세포내용물 분비물 추출물 또는 6 . “ (herbal substances)” “ , , , ․
광물 을 말하고 가공되지 않은 건조 형태로 신선한 것을 사용하거나 공정서에 따른 포제품 도 해당될 수 ” , ( )炮製品
있다 한약 생약 제제 는 한약 생약 자체 또는 그 추출 분획물 등을 사용하여 제조. “ ( ) (herbal medicinal products)” ( ) ․
한 의약품으로 생약 및 한약 생약 제제와 그 원료 의약품을 포괄적으로 나타낸다 가이드라인 쪽, ( ) . 19-20 .

6) 가이드라인 쪽은 지표성분 에 관하여 생약 생약 조제품 또는 한약 생약 제제의 품질관리 목적으로 20 “ (markers)” , “ , ( )
사용되는 화학적으로 규명된 성분 군 활성 지표성분 과 분석 지표성분 으로 ( ). (active marker) (analytical marker)
구분할 수 있음 이라는 설명을 제시하고 있다 즉 그러한 지표성분 중 약리학적 활성을 나타내는 성분을 활성 ” . , ‘
지표성분 조성을 분석하기 쉬운 성분을 분석 지표성분이라 한다 흔히 후박’, ‘ ’ . ( , 厚朴 Magnolia officinalis 에 특유)
하게 함유된 마그놀올 과 호노키올(Magnolol) (Honokiol)을 지표성분의 예로 든다 마그놀올 호노키올의 ( , 화학식과
분자량은 C18H18O2 로 같다, 266.34 ).

- 14 -

된 특정한 어느 한 가지 성분이나 공통된 약리활성을 갖는 몇 가지 성분들로부터 발현

된다기보다는 서로 다른 약리활성을 가질 수도 있는 전체 활성성분 간의 상가, ( ), 相加

상승 상쇄 등 상호작용의 총화에 의한 것이라고 해석함이 타당하다( ), ( ) .上乘 相殺 7)

추출물은 제조방법에 따라 성분과 함량이 달라진다는 것이 이 사건 특허발명이

속한 기술분야의 상식인바 구성요소 에 열거된 온도 압력 반응시간을 달리하면 , 2-1 , ,

최종적으로 얻게 되는 돌외추출물도 미처 밝혀지지 않은 화합물까지 포함하여 구조와

성질이 달라질 수밖에 없다.

다 구성요소 도 이 사건 제 항 발명의 구성을 특정하는 요소이다 다만 앞서 ) 2-2 2 . ,

본 바와 같은 추출물의 특성상 구성요소 의 방법으로 제조한 돌외추출물의 성분이 2-1

다물린 에 한정된다고는 말할 수 없다A, B .8) 그렇다면 구성요소 는 구성요소 2-2 , 2-1

의 방법에 따라 돌외추출물을 제조하면 그 추출물에 존재하는 여러 미지의 화합물도

고온고압반응 처리 전과 비교하여 구조와 성질 등이 달라질 것이지만 그중에서 특히 ,

다물린 의 증가된 함량을 조성상 특징으로 집어낸 것이라고 봄이 타당하다A, B ( ) .

라 그러나 구성요소 은 기존 돌외추출물 도 가지고 있던 ) 2-3 (TG1022) 효능 효과․

에 관한 기재로 이 사건 특허발명 명세서 식별번호 새로운 돌외추출물( [0026~0028]),

에서 다물린 함량 증가로 인해 효능이 증강되었는지는 별론으로 하고 (TG1022F) A, B

그러한 용도 한정으로 돌외추출물의 조성과 함량이 바뀌는 것은 아니다.

마 따라서 이 사건 제 항 발명은 구성요소 의 제조방법과 구성요소 의 조 ) 2 ‘ 2-1 2-2

성으로 한정된 물건 돌외추출물 의 발명이라고 보고 선행발명과 대비하여야 한다( ) ’ .

7) 대표저자 한대석 생약학 동명사 쪽 생약학교재편찬위원회 생약학 동명사 쪽 등 참조 , , , 1988, 4 ; , , , 2006, 6 .
8) 이 사건 특허발명 명세서 식별번호 는 다물린 가 이 사건 제 항 발명의 유효지표성분이라는 취지로 [0019] A, B 2 ‘ ’

쓰고 있다.

- 15 -

선행발명 과 대비 2) 1

이 사건 제 항 발명과 선행발명 의 구성요소를 대비하면 다음 표와 같다 2 1 .

가 차이점 분석 )

이 사건 제 항 발명의 구성요소 에서 돌외잎 에탄올 추출물 농축액 을 (1) 2 2-1 “ ”

얻는 방법이 한정되어 있지는 않으나 이 사건 특허발명 명세서는 에탄올 수용액으로 ,

두 번 추출하여 합친 뒤 여과 분리 농축한 돌외추출물 농축액 를 들고 있고, , “TG1022”

식별번호 구성요소 은 그 농축액의 고온고압반응 처리 조건을 특정하고 ( [0015]), 2-1

있다 선행발명 의 대응되는 구성요소는 단계로 구분한 돌외추출물 제조방법인데. 1 5~6 ,

이 사건 제 항 발명에는 없는 부탄올 분획공정이 단계에 포함되어 있지만2 1- (d) ,10) 그

농축액의 고온고압반응 처리는 포함하고 있지 않다 이하 차이점 이라 한다( ‘ 1’ ).

9) 이하 이 판결의 각 구성요소 대비표에서 대괄호 안에 적은 숫자는 해당 발명의 명세서 식별번호를 뜻한다 .
10) 선행발명 을 출원한 피고는 첫 변론기일에서 단계가 부탄올 분획법에 해당한다고 진술하였다 1 2023. 4. 6. (d) .

구성
요소

이 사건 제 항 발명2 선행발명 1

2-1

돌외잎 에탄올 추출물 농축

액을 기100~125 , 1.2~690℃

압 시간 동안 또는 , 0.5~24

기압45~100 , 690~1100 , ℃

시간 동안 고온고압12~24

반응 처리하여 제조

마쇄된 돌외잎을 에탄올 같은 수성 알코올에서 (a) 70%

추출 반복 두 번째 수용성 알코올 추출물 용출액 ; (b) (a) ,

회수하고 에서 획득한 두 알코올 추출물 합침(a), (b) ; (c)

알코올 증발시킨 후 그 용액을 증류수와 혼합하고 여과;

상기 용액을 부탄올 물층과 혼합 후 부탄올 증발(d) 1- , 1- ;

건조하여 회수된 용출액의 액상 부분 감소시켜 유기성 (e)

물질 회수 돌외추출물 분말 형태 제조 필요에 따라 , ; (f)

추가 분리 및 정제 단계 포함 식별번호 ( [0094~0103]9))

2-2

다물린 는 A 0.7~7%(w/w),

다물린 는 를 B 0.5~6%(w/w)

유효성분으로 포함하는 것

을 특징으로 하는 비만 등 (

개선 및 치료용 돌외추출물)

돌외잎 추출물의 주요 구성성분은 가이페노사이드[0012]

본 발명 치료용 조성물의 가이페노사이드 함량은 [0042]

약 중량0.5~10 %

인슐린 저항성 증후군[0001, 0022, 0023, 0094~0096] ( ,

비만 고지혈증을 치료할 수 있는 돌외추출물, )

- 16 -

이 사건 제 항 발명의 구성요소 는 앞에서 본 바와 같이 (2) 2 2-2 다물린 의 A, B

증가된 함량을 대표적 특징으로 내세우고 있다 그러나 ( ) . 선행발명 은 돌외잎 추출물1 ‘

의 주요 구성성분은 가이페노사이드라고만 하여 성분군 을 언급했을 뿐 명세서 ’ ( ) (成分群

식별번호 개별 성분인 [0012]), 다물린 에 관하여 언급하지 않고 함량을 기재하고 A, B

있지도 않다는 점에서 이 사건 제 항 발명과는 차이가 있다 이하 차이점 라 한다2 ( ‘ 2’ ).11)

나 차이점 검토 )

원고는 구성요소 이 이 사건 제 항 발명의 구조나 성질을 특정하는 요소가 2-1 2

아님을 전제로 구성요소 는 선행발명 에 내재된 구성 또는 속성에 해당하므로 , ‘ 2-2 1

이 사건 제 항 발명과 선행발명 은 실질적으로 동일하다는 취지로 주장한다 그러나 2 1 ’ .

구성요소 이 이 사건 제 항 발명의 기술적 구성을 특정하는 요소임은 앞에서 본 바2-1 2

와 같다 나아가 차이점 이 새로운 효과가 발생하지 않는 정도의 미세한 차이에 불과. 1

한지를 보려면 이 사건 제 항 발명과 선행발명 의 각 방법에 따라 제조한 추출물이 , 2 1

필연적으로 같은 구성이나 속성을 갖는지 차이점 를 따져보아야 한다 따라서 , 2 . 차이점

과 차이점 는 함께 검토하는 것이 타당하다1 2 .

앞서 인정한 사실 앞서 든 증거 갑 제 호증 을 제 호 , , 11, 12, 13, 17, 19, 21, 53 , 2

증 각 기재 및 변론 전체 취지를 종합하여 알 수 있는 다음 사정에 비추어 보면 원고,

가 제출한 증거만으로는 선행발명 의 방법에 따라 제조한 돌외추출물이 제조방법상 ‘ 1

차이점 에도 불구하고 이 사건 제 항 발명과 같은 조성을 가지고 있어 차이점 가 그 1 2 2

추출물에 필연적으로 내재된 구성 또는 속성에 해당한다는 점을 인정할 수 없다’ .

11) 성분군 은 유사한 구조와 특성을 가진 여러 화합물의 집합을 나타낸다 가이페노사이드 진세노사이드가 ( ) . , 成分群
성분군을 가리키는 이름이라면 가이페노사이드 진세노사이드 등은 개별 화합물을 가리킨다 선행발명 , X, Rk3 ( 5

선행발명 식별번호 등 참조table 1, 6 [ 0016] ).

- 17 -

이 사건 특허발명의 실시례 은 돌외잎 에탄올 추출물을 고온고압반응 처리 (1) 1

없이 아세톤 헥산 에틸아세테이트 부탄올로 수차례 분획만 하여 다물린 , n- , , n- A 14 , ㎎

다물린 을 얻었는바 명세서 식별번호 돌외잎 추출물을 부탄올로 B 10 ( [0030~0035]), ㎎

분획하는 선행발명 에도 다물린 가 함유되어 있을 것이라고 인정할 수는 있다1 A, B .

단순 돌외추출물에 다물린 가 함유되었음은 이 사건 특허발명 명세서의 기존 돌외A, B

추출물 관련 내용 갑 제 호증 별지 참조 으로도 확인된다(TG1022) , 11, 12(19), 13 ([ 3] ) .

그런데 이 사건 특허발명 명세서에는 단순 돌외추출물 은 다물린 (2) ‘ (TG1022)

함량이 유효효과를 나타낼 정도로 높지 않은 편이었고 다물린 함량을 증가A, B , A, B

시킨 신규 돌외추출물 은 강력한 활성화 능력을 가짐이 확인되었다(TG1022F) AMPK .’

라는 기재가 있고 식별번호 의 다물린 다물린 함량은 각각 ( [0055]), TG1022 A, B 0.37

로 이 사건 제 항 발명 구성요소 의 ±0.03%(w/w), 0.28±0.02%(w/w) 2 2-2 0.7~7%(w/w),

와는 상당한 차이가 있다 식별번호 위 식별번호 의 0.5~6%(w/w) ( [0058, 0059]). [0059]

표 에 따르면 온도가 더 높거나 압력이 높아지고 처리시간이 길어질수록 다물린 2 A,

의 함량이 증가한다는 사실도 확인된다 갑 제 호증을 보아도 열처리하지 않은 B . 12(19) ,

돌외추출물의 다물린 다물린 함량은 각각 환산하여 A, B 213±3.6 /g, 34.1±2.3 /g, ㎍ ㎍

로 구성요소 의 범위에는 많이 못 0.0213±0.00036%(w/w), 0.00341±0.00023%(w/w) , 2-2

미친다 선행발명 도 이 사건 제 항 발명과 같은 고온고압반응 처리를 하지 않는 한. 1 2 ,

다물린 함량이 이 사건 제 항 발명과는 차이가 날 것이라고 생각할 수 있다A, B 2 .

선행발명 에도 돌외에서 사포닌을 분리하여 가이페노사이드라 명명한 것을 (3) 5 ‘

계기로 지금까지 약 여 종의 사포닌이 분리된 것으로 보고되었다는 내용은 있으나 100 ’

그동안 분리된 사포닌을 열거한 에는 다물린 가 없고 해당 내용의 원래 Table 1. A, B ,

- 18 -

출처인 을 제 호증2 12)에서도 물과 부탄올 분획 등 방법으로 가이페노사이드를 분‘ 1:1 ’

리했지만 다물린 가 동정 되지 않았음이 확인된다 이처럼 이 사건 특허발명 A, B ( ) . 同定

출원일 전에 다물린 가 보고되지 않았던 것은 그것이 단순 돌외추출물에는 미량만 A, B

함유되어 있어서 규명이 쉽지 않았기 때문이었다고 보이고 증가된 함량의 다물린 , A,

를 얻는 방법도 인식되지 않고 있었다고 보인다B .

선행발명 이 일의적으로 명확하게 정의된 제조방법이라고 보기도 어렵다 (4) 1 .

추출물에는 여러 화합물이 혼합되어 있어 개별 성분의 구조와 활성을 규명하는 것이

쉽지 않고 원재료를 채취하는 시기 계절 년생 장소 원산지 부위 등 채취방법 수확 , ( , ), ( ), ,

후 건조방법 온도 시간 추출용매의 종류 농도 부피 추출하는 온도 시간 횟수 등 ( , ), , , , , ,

추출방법에 따라 추출물의 성분과 함량이 달라질 수 있다.13) 돌외도 부위 생육환경 , ,

수확시기 등에 따라 사포닌 성분 구성이 현저히 달라진다는 것이 알려져 있다.14) 그런

데 선행발명 은 하나의 구현례 로서 단계를 포함하는 제조방법을 넓게 예시1 “ ” (a)~(f) “ ”

하고 있고 에탄올의 용량 추출하는 시간 온도 등을 한정하고 있지 않다 단계에, , , . (f)

서는 필요에 따라 분리 및 정제 단계를 추가할 수도 있다 위와 같은 조건을 어떻게 “ ” .

설정하고 단계를 추가하는지 등에 따라 추출물의 조성은 얼마든지 달라질 수 있다.

이 사건 제 항 발명에서 고온고압반응 처리를 했을 때 다물린 함량이 (5) 2 A, B

증가하는 것은 가이페노사이드 화합물의 배당체 글리코사이드 중 한 위치에서 ( , ) 配糖體

당 성분이 분리되어 탈당반응 히드록시기로 전환되고 히드록시기가 다시 바로 옆의 ( )

탄소에 결합된 수소 원자와 반응하여 물로 제거됨을 통하여 탈수반응 다물린 로 ( ) A, B

12) Valentina Razmovski-Naumovski et al., “Chemistry and Pharmacology of Gynostemma pentaphyllum”,
Phytochemistry Reviews 쪽 선행발명 갑 제 호증 에서 은 오기임이 명백하다, 4, 2005, 198-199 . 5( 8 ) “Valentian” .

13) 식품의약품안전청 건강기능식품 개발자를 위한 기능성 원료 표준화 지침서 쪽 참조 , , 2008, 30 .
14) 을 제 호증 쪽 선행발명 갑 제 호증 쪽 등 참조 2 200 ; 5( 8 ) 3 .

- 19 -

바뀌는 과정에 기초하고 있다 아래 그림 참조 그러나 고온고압반응 처리로 탈당 및 ( ).

탈수반응이 일어났을 때 추출물 내의 화합물이 모두 다물린 로만 변환된다고 볼 A, B

수는 없고 여러 미지의 화합물들도 변화를 겪을 수밖에 없다 그 점에서도 선행발명 . 1,

이 사건 제 항 발명의 각 방법으로 얻은 추출물들이 같은 구성 또는 속성을 가진다고 2

단정할 수 없다 일부 성분 예컨대 유효성분인 다물린 의 함량 범위가 같다 하더( , A, B

라도 추출물의 전체 조성은 다르다고 보아야 한다).

이에 대하여 원고는 피고가 선행발명 명세서 시험데이터 일부가 이 사건 (6) , ‘ 1

제 항 발명 추출물 을 이용한 것임을 자인하였을 뿐만 아니라 원고가 재현한 2 (TG1022F) ,

단순 돌외추출물 갑 제 호증 에도 구성요소 범위에 드는 다물린 가 함유되어 ( 17 ) 2-2 A, B

있음이 증명되었으므로 이 사건 제 항 발명은 선행발명 에 내재된 구성 또는 속성을 , 2 1

발견한 것에 불과하다고 주장한다 그러나 선행발명 명세서는 이 사건 제 항 발명과 ’ . 1 2

같은 고온고압반응 처리에 관하여 전혀 언급하고 있지 않고 통상적인 에탄올 추출물,

15) Dao-Jin Chen et al., “Metabolic profiling of Gynostemma pentaphyllum extract in rat serum, urine and
faeces after oral administration”, Journal of Chromatography B 쪽의 그림이다, 969, 2014, 43 .

갑 제 호증 12 Fig. 1(A) 갑 제 호증 참고도 53 215)

- 20 -

과 부탄올 분획공정을 제시하고 있을 뿐이다 통상의 기술자가 선행발명 을 참고하고 . 1

일부 창작능력을 발휘하여 제조한 추출물이 구성요소 범위의 다물린 함량을 2-2 A, B

갖는 경우가 있다고 하더라도 선행발명 의 한 실시례에서 우연히 지표가 되는 유효, ‘ 1

성분인 다물린 가 위 범위에서 함유된 결과가 나타났다는 것을 의미할 뿐 선행A, B ’ , ‘

발명 의 제조방법에 따른 추출물이 이 사건 제 항 발명의 추출물과 필연적으로 같은 1 2

구성 또는 속성을 가진다는 점이 증명되었다고 볼 수는 없다’ .

다 소결 )

이 사건 제 항 발명은 선행발명 과 실질적으로 동일하지 않으므로 선행발명 2 1 , 1

에 의하여 신규성이 부정되지 아니한다.

선행발명 과 대비 3) 6

이 사건 제 항 발명과 선행발명 의 구성요소를 대비하면 다음 표와 같다 2 6 .

구성
요소

이 사건 제 항 발명2 선행발명 6

2-1

돌외잎 에탄올 추출물 농축

액을 기100~125 , 1.2~690℃

압 시간 동안 또는 , 0.5~24

기압45~100 , 690~1100 , ℃

시간 동안 고온고압12~24

반응 처리하여 제조

담마란 화합물을 함유한 인삼속 식물 또는 돌외를 [0033]

바람직하게는 에서 분 시간 바람직50~200 ( 120 ) 30 ~10 (℃ ℃

하게는 시간 가열 가공한 후 저급알코올이나 그 혼합물3 ) ,

로 이루어진 군에서 선택되는 용매 바람직하게는 ( CH3OH)

를 넣고 환류 추출하여 여과하는 조작을 회 이상 바람직1 (

하게는 회 실시하고 여액을 합해 감압농축하여 3 ) CH3OH

추출물 얻고 그 추출물에서 감압하에서 용매를 건조시키,

고 잔사를 물에 현탁시켜 CH2Cl2과 수포화 을 차n-BuOH

례로 사용해 CH2Cl2 분획 분획 , n-BuOH , H2 분획으로 O

나누며 각 분획을 감압하에서 증발 건조하여 추출물 얻음,

2-2

다물린 는 A 0.7~7%(w/w),

다물린 는 를 B 0.5~6%(w/w)

유효성분으로 포함하는 것

담마란 화합물에서 가열과정 중 글리코실 잔기의 [0009]

이탈로 등이 생성되며 이어서 번 Rg2, Rg3, Rh2, Rh1 20

위치에서 탈수반응 일어나 생성Rg5, Rk1, Rh3, F4, Rh4

- 21 -

가 차이점 분석 )

이 사건 제 항 발명의 구성요소 은 돌외잎의 에탄올 추출물 농축액 을 고온 2 2-1 “ ”

고압반응 처리하는 구성인 반면 선행발명 에서는 추출 전의 인삼속 식물 또는 돌외 , 6

자체를 가열 가공한 후 여과 농축 분획 등 과정을 진행한다 위와 같은 열처리가 “ , ” , , .

압력을 가하지 않은 환경에서 수행된다는 점에서도 다르다 이하 차이점 이라 한다( ‘ 3’ ).

이 사건 제 항 발명의 구성요소 는 다물린 의 각 함량을 특징으로 들고 2 2-2 A, B

있는 반면 선행발명 에서는 진세노사이드 , 6 Rk3, Rh4, PD, PT, PPD, PPT, DHPPD- , Ⅰ

가 유효성분으로 제시되어 있다 이하 차이점 라 DHPPD- , DHPPT- , DHPPT- ( ‘ 4’Ⅱ Ⅰ Ⅱ

한다).

나 차이점 검토 )

원고는 차이점 에도 불구하고 이 사건 제 항 발명이 선행발명 과 실질적 ‘ 3, 4 2 6

으로 동일하다는 취지로 주장한다’ .

앞서와 마찬가지로 차이점 를 함께 검토하건대 앞서 인정한 사실 앞서 든 3, 4 , ,

증거 및 변론 전체 취지를 종합하여 알 수 있는 다음 사정에 비추어 보면 이 사건 제,

항 발명은 선행발명 과 실질적으로 동일하다고 볼 수 없다2 6 .

추출물은 재료 선택과 제조방법 등에 따라 성분과 함량이 달라질 수 있는바 (1) ,

이 사건 제 항 발명과 선행발명 의 각 추출물들은 제조방법상의 차이점 으로 인해 2 6 3

필연적으로 같은 구성 또는 속성을 가진다고 단정할 수는 없다.

게다가 두 발명은 서로 다른 성분을 유효성분으로 제시하고 있다 (2) .

을 특징으로 하는 비만 등 (

개선 및 치료용 돌외추출물)

진세노사이드 [0016] Rk3, Rh4, PD, PT, PPD, PPT,

또는 를 유효DHPPD- , DHPPD- , DHPPT- , DHPPT-Ⅰ Ⅱ Ⅰ Ⅱ

성분으로 포함하는 신장질환 예방 및 치료용 약학 조성물( )

- 22 -

선행발명 에서 담마란 화합물의 가열로 글리코실 잔기가 이탈하고 이어서 (3) 6 ‘

탈수반응이 일어난다는 부분이 이 사건 제 항 발명의 탈당 및 탈수반응과 실질적으로 ’ 2

동일한 과정을 표현한 것이라 하더라도 두 발명에 따른 각 추출물의 조성이 같다고 ,

볼 수 없는 이상 그 가열과정에는 각 추출물에 함유된 여러 미지의 화합물들도 함께 ,

변화를 겪을 수밖에 없다.

다 소결 )

이 사건 제 항 발명은 선행발명 에 의하여 신규성이 부정되지 아니한다 2 6 .

다 이 사건 제 내지 항 발명의 신규성 . 3 6

이 사건 제 내지 항 발명은 이 사건 제 항 발명의 돌외추출물을 포함하는 치료용 3 6 2

약학 조성물 또는 기능식품에 관한 발명으로서 이 사건 제 항 발명의 신규성이 부정, 2

되지 않는 이상 이 사건 제 내지 제 항 발명의 신규성도 부정되지 아니한다, 3 6 .

라 이 사건 제 항 발명의 신규성 . 7, 8

관련 법리 1)

의약용도발명에서는 특정 물질과 그것이 갖고 있는 의약용도가 발명을 구성하는

것이고 약리기전은 특정 물질에 불가분적으로 내재된 속성으로서 특정 물질과 의약용,

도와의 결합을 도출해 내는 계기에 불과하다 따라서 의약용도발명의 청구범위에 기재.

되어 있는 약리기전은 특정 물질이 갖고 있는 의약용도를 특정하는 한도에서만 발명의

구성요소로서 의미를 가질 뿐 약리기전 그 자체가 청구범위를 한정하는 구성요소라고

보아서는 아니 된다 대법원 선고 후 판결 참조( 2014. 5. 16. 2012 3664 ).

이 사건 제 항 발명과 이 사건 제 항 발명의 관계 2) 7 8

원고는 이 사건 제 항 발명의 신규성이 선행발명 또는 선행발명 에 의해 ‘ 7, 8 1 6

- 23 -

부정된다고 주장하는바 이 사건 제 항 발명의 기술적 구성을 보면 이 사건 제 항 ’ , 7, 8 , 7

발명은 다물린 또는 다물린 중 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 비만 당뇨A B , ,

고지혈증 개선 및 치료용 약학 조성물이고 이 사건 제 항 발명은 이 사건 제 항 발명, 8 7

을 인용하면서 그 약리기전을 효소 활성 증가로 한정하는 형식을 취하고 있다AMPK .

그런데 위 약리기전은 이 사건 제 항 발명의 특정 물질에 불가분적으로 내재된 속성에 7

불과하므로 청구범위를 한정하는 구성요소라고 볼 수 없다, .

그렇다면 이 사건 제 항 발명과 이 사건 제 항 발명은 실질적으로 같은 의약용도 7 8

발명에 해당하고 이 사건 제 항 발명의 신규성이 부정되지 않는다면 이 사건 제 항 , 7 8

발명의 신규성도 부정되지 아니한다.

구성요소 대비 3)

이 사건 제 항 발명과 선행발명 의 7 1, 6 구성요소를 대비하면 다음 표와 같다.

구성요소 4) 7-1

이 사건 제 항 발명의 구성요소 은 의약용도발명의 유효성분을 다물린 또 7 7-1 “ A

는 다물린 의 화합물 중 하나 이상 으로 한정하고 있는 반면 선행발명 과 선행발명 B ” , 1

은 다물린 를 유효성분으로 제시하고 있지 않다 이하 차이점 라 한다6 A, B ( ‘ 5’ ).

구성
요소

이 사건 제 항 발명7 선행발명들

7-1
다물린 또는 다물린 의 A B

화합물 중 하나 이상을 유효

성분으로 함유

선행발명 돌외잎 추출물( 1)

선행발명 인삼속 식물 또는 돌외의 추출물에서 ( 6) [0016]

얻은 진세노사이드 성분 종10

7-2

비만 당뇨 또는 고지혈증의 ,

개선 및 치료용 약학 조성물

선행발명 인슐린 저항성 증후군 비만 고지혈( 1) [0001] , ,

증 개선 및 치료용 조성물

선행발명 신장 보호용 약학 조성물 담( 6) [0015] , [0011]

마란 화합물의 항산화작용 항암작용 혈액순환 개선작용, ,

- 24 -

앞서 인정한 사실 앞서 든 증거 및 변론 전체 취지를 종합하여 알 수 있는 다음 ,

사정에 비추어 보면 이 사건 제 항 발명은 선행발명 또는 선행발명 과 실질적으로 , 7 1 6

동일하다고 볼 수 없다.

가 추출물에는 여러 화합물이 혼합되어 있어 그에 함유된 개별 화합물의 구조와 )

특성을 모두 밝혀내기가 어렵다 그러한 기술적 어려움 때문에 자연에 존재하는 여러 .

혼합물에서 개별 화합물을 분리하고 화학적 구조를 규명하는 천연물화학이 필요한 것

이다 추출물은 종종 통합적인 성분군으로 취급되며 제품의 표준화 규격화 및 안전성 . , ,

보장을 위해 지표성분 같은 개념을 정의한다 추출물은 채취방법 수확 후 건조방법. , ,

추출방법 등에 따라 성분과 함량이 달라질 수 있는바 어떤 화합물을 분리해 낸 기원 ,

식물의 추출물들이 개시되어 있다고 하여 그 유효성분이 모두 실질적으로 동일하다고

말할 수는 없다.

나 선진특허분류 국제특허분류 상으로도 특정한 유기화합물을 함유하는 ) (CPC), (IPC)

의약품 의약용도발명은 유기활성성분을 함유하는 의약품 제제 로 분류되고, “A61K 31”( ) ,

식물 등에서 유래하여 조성이 정확히 알려지지 않은 추출물을 함유하는 의약품 등은

조류 이끼류 균류 식물 또는 그 유도체로부터의 물질을 함유하는 미지 구“A61K 36”( , , ,

조의 의약품 제제 예컨대 전통 한약재 으로 분류한다, ) .16)

다 이 사건 제 항 발명은 다물린 와 다물린 각각의 화학 구조식을 제시하고 ) 7 A B

있는 반면 선행발명 과 선행발명 은 다물린 의 존재를 인식하고 있지도 않다, 1 6 A, B .

선행발명 은 가이페노사이드가 아니라 진세노사이드 종을 유효성분으로 특정하여 6 10

화학 구조식을 제시하고 있을 뿐이다.

16) 예컨대 선행발명 에는 세분류는 필요한 범위에서만 기재한다 이하 같다 외에도 , 1 A61K 31( , ), A61P “A61K
돌외속 코드가 부여되었지만 선행발명 에는 코드가 부여되지 않았다36/424”( ) , 6 A61K 36 .

- 25 -

소결 5)

이 사건 제 항 발명은 차이점 로 인하여 7 5 선행발명 또는 선행발명 과 실질적1 6

으로 동일하다고 볼 수 없으므로 구성요소 가 위 선행발명들의 일부 구성요소와 , 7-2

겹친다 하더라도 신규성이 부정되지 아니한다 또한 이 사건 제 항 발명의 신규성이 . 7

부정되지 않는 이상 이 사건 제 항 발명의 신규성도 부정되지 아니한다8 .

마 소결론 .

이 사건 특허발명은 신규성이 없다는 원고의 주장은 모두 이유 없다 .

이 사건 제 내지 항 발명의 진보성 유무5. 1 8

가 관련 법리 .

발명의 진보성을 판단할 때는 선행기술의 범위와 내용 진보성 판단 대상 발명과 , ,

선행기술의 차이 통상의 기술자가 가진 기술수준을 기록에 나타난 자료로 파악한 뒤, ,

이를 기초로 통상의 기술자가 특허출원 당시 기술수준에 비추어 진보성 판단 대상이

된 발명이 선행기술과 차이가 있음에도 그 차이를 극복하고 선행기술로부터 그 발명을

쉽게 할 수 있는지를 살펴보아야 한다 이때 진보성 판단 대상 발명의 명세서에 개시.

되어 있는 기술을 알고 있음을 전제로 사후적으로 통상의 기술자가 그 발명을 쉽게 할

수 있는지 판단하여서는 아니 된다 대법원 선고 후 판결 참조( 2016. 11. 25. 2014 2184 ).

나 이 사건 제 항 발명의 진보성 . 1

1) 구성요소 대비

원고는 이 사건 제 항 발명은 선행발명 의 결합 또는 선행발명 내지 ‘ 1 1, 4, 5 1 5

의 결합에 의하여 진보성이 부정된다고 주장하는바 이 사건 제 항 발명과 선행발명 ’ , 1 1

의 구성요소를 대비하면 다음 표와 같다.

- 26 -

2) 차이점 분석

이 사건 제 항 발명은 이 사건 제 항 발명에 관하여 본 것과 마찬가지로 1 , 2 고온

고압반응 처리 유무 차이점 다물린 성분과 함량의 특정 여부 차이점 에서 ( 1), A, B ( 2)

선행발명 과 차이가 있다1 .17)

3) 차이점 검토

앞서 인정한 사실 앞서 든 증거 및 변론 전체 취지를 종합하여 알 수 있는 다음 ,

사정에 비추어 보면 통상의 기술자가 , 선행발명 를 결합하거나 선행발명 내지 1, 4, 5 1

를 결합하더라도 5 차이점 를 쉽게 극복할 수 있다고 보기 어려우므로 이 사건 제1, 2 ,

항 발명은 위 결합들1 에 의하여 진보성이 부정되지 아니한다.

가 선행발명 은 돌외잎을 에탄올로 추출한 뒤 그 농축액을 고온고압반응 처리할 ) 1

17) 이 사건 제 항 발명과 이 사건 제 항 발명은 청구항이 다르지만 선행발명 과는 같은 면에서 차이가 나므로 1 2 1 ,
이 사건 제 항 발명에서처럼 차이점 차이점 라 한다2 ‘ 1’, ‘ 2’ .

구성
요소

이 사건 제 항 발명1 선행발명 1

1-1

돌외잎 에탄올 추출물 농축

액을 기100~125 , 1.2~690℃

압 시간 동안 또는 , 0.5~24

기압45~100 , 690~1100 , ℃

시간 동안 고온고압12~24

반응 처리하여

마쇄된 돌외잎을 에탄올 같은 수성 [0094~0103] (a) 70%

알코올에서 추출 반복 두 번째 수용성 알코올 추; (b) (a) ,

출물 용출액 회수하고 에서 획득한 알코올 추출물 (a), (b)

합침 알코올을 증발시킨 후 증류수와 혼합하고 여과; (c) ;

상기 용액을 부탄올 물층과 혼합 후 부탄올 증발(d) 1- , 1- ;

건조하여 회수된 용출액의 액상 부분 감소시켜 유기성 (e)

물질 회수 돌외추출물 분말 형태 제조 필요에 따라 , ; (f)

추가 분리 및 정제 단계 포함

1-2

돌외잎 추출물 농축액 건조

분말의 다물린 함량이 A 0.7

다물린 함량이 ~7%(w/w), B

로 증가된 돌외0.5~6%(w/w)

추출물 제조방법

돌외잎 추출물의 주요 구성성분은 가이페노사이드[0012]

가이페노사이드 함량은 약 중량[0042] 0.5~10 %

- 27 -

동기를 암시 또는 제시하고 있지 않다 또한 돌외추출물의 유효성분을 가이페노사이드.

라고만 기재하였을 뿐 다물린 를 유효성분으로 인식하고 있지 않다, A, B .

나 선행발명 는 인삼에 진세노사이드 가 함유되어 있다는 점이 공지된 ) 4 Rg3, Rg5

상태에서 열처리로 그 함량을 증가시킨 발명이다 그러나 재료가 돌외가 아니고 가이.

페노사이드인 다물린 를 유효성분으로 인식하고 있지도 않다는 점에서 다물린 A, B , A,

함량 증가를 위해 선행발명 에 선행발명 를 결합할 동기가 있다고 보기 어렵다B 1 4 .

다 선행발명 는 돌외 사포닌을 효소 처리하여 부가가치가 높은 인삼 사포닌으로 ) 5

변환하는 방법에 관한 연구로 이 사건 제 항 발명과는 목적이 다르다 당시까지 보고, 1 .

된 여 종의 돌외 사포닌을 열거했다는 에도 다물린 는 기재되어 있지 100 Table 1. A, B

않다 선행발명 가 통상적 처리방법으로 예시하고 있는 열처리를 통해 돌외 사포닌을 . 5

다른 사포닌으로 변환한다는 측면에서 보더라도 그렇게 변환된 사포닌을 다물린 , A, B

라고 인식할 근거가 없다.

라 선행발명 에는 제조방법에 관한 구체적 기재가 없고 선행발명 에도 돌외를 ) 2 , 3

주정 추출하였다는 기재가 있을 뿐이다 돌외잎 에탄올 추출물 농축액을 고온고압반응 .

처리하면 다물린 의 함량이 증가한다는 점에 관한 기재나 암시도 없다A, B .

소결 4)

이 사건 제 항 발명은 선행발명들에 의하여 진보성이 부정되지 아니한다 1 .

다 이 사건 제 항 발명의 진보성 . 2

선행발명 또는 선행발명 의 결합과 대비 1) 1 1, 2, 3

앞서 본 바와 같이 이 사건 제 항 발명과 선행발명 은 고온고압반응 처리 유무 2 1 ,

차이점 다물린 성분과 함량의 특정 여부 차이점 등에서 차이가 있다( 1), A, B ( 2) .

- 28 -

앞서 인정한 사실 앞서 든 증거 및 변론 전체 취지를 종합하여 알 수 있는 다음 ,

사정에 비추어 보면 통상의 기술자가 선행발명 단독으로나 선행발명 을 결합, 1 1, 2, 3

하여 차이점 를 쉽게 극복할 수 있다고 보기 어려우므로 이 사건 제 항 발명은 1, 2 , 2

선행발명 또는 1 선행발명 의 결합에 의하여 진보성이 부정되지 아니한다1, 2, 3 .

가 선행발명 은 돌외잎 에탄올 농축액을 고온고압반응 처리할 동기를 암시 또는 ) 1

제시하고 있지 않다 다물린 를 유효성분으로 인식하고 있지도 않다. A, B .

나 선행발명 에는 제조방법에 관한 구체적 기재가 없고 선행발명 에도 돌외를 ) 2 , 3

주정 추출하였다는 기재가 있을 뿐이다 돌외잎 에탄올 추출물 농축액의 고온고압반응 .

처리에 관한 동기를 암시하거나 제시하고 있지도 않다.

다 선행발명 이 체중감소 효과를 언급하고는 있으나 그 약효성분을 다물린 ) 2, 3

로 특정하고 있지는 않으며 이를 암시하고 있다고 볼 기재도 없다 고온고압반응 A, B , .

처리로 다물린 의 함량이 증가할 것이라는 점에 관한 기재나 암시도 없다A, B .

선행발명 또는 선행발명 의 결합과 대비 2) 6 1, 6

앞서 본 바와 같이 이 사건 제 항 발명과 선행발명 은 열처리의 순서와 고압 2 6 ,

조건 유무 차이점 다물린 성분 특정 여부 차이점 등에서 차이가 있다( 3), A, B ( 4) .

앞서 인정한 사실 앞서 든 증거 및 변론 전체 취지를 종합하여 알 수 있는 다음 ,

사정에 비추어 보면 통상의 기술자가 선행발명 단독으로나 선행발명 과 선행발명 , 6 1

을 결합하여 차이점 를 쉽게 극복할 수 있다고 보기 어려우므로 이 사건 제 항 6 3, 4 , 2

발명은 선행발명 또는 1 선행발명 의 결합에 의하여 진보성이 부정되지 아니한다1, 6 .

가 선행발명 에서 열처리는 차 를 제조할 때 생잎의 발효를 막기 위해 찻잎을 ) 6 ( )茶

솥에 넣고 고온에서 타지 않을 정도로 볶아서 익히는 과정인 덖음에 대응되는 것이다.

- 29 -

그러나 선행발명 에서 그 돌외잎을 에탄올로 추출한 뒤의 농축액을 열처리할 동기는 6 ,

찾을 수 없다 세 번에 걸쳐 감압 조건을 제시하고 있는 선행발명 에서 고압하에서의 . 6

열처리를 도출하기도 어렵다.

나 이 사건 제 항 발명과 선행발명 은 열처리를 제외하고도 추출 및 분획과정 ) 2 6

등에 차이가 있어 똑같이 고온고압 처리를 한다고 하여 사포닌 성분의 탈당 및 탈수,

반응이 동일하게 진행될 것이라고 단정할 수 없다.

다 선행발명 은 다물린 의 존재를 인식하고 있지 않고 가이페노사이드가 ) 6 A, B ,

아닌 진세노사이드 종을 유효성분으로 특정하여 화학 구조식을 제시하고 있다10 .

라 한편 선행발명 에도 돌외잎의 에탄올 추출물 농축액을 고온고압반응 처리할 ) 1

동기는 나타나 있지 않고 선행발명 이 다물린 를 유효성분으로 인식하고 있지도 , 1 A, B

않다 선행발명 은 기본적으로 돌외보다는 인삼을 재료로 신장질환의 예방과 치료를 . 6 ,

위한 약학 조성물을 제공하려는 발명이라는 점에서 명세서 식별번호 등 ( [0006, 0030]

참조 선행발명 과 결합할 동기가 약하다), 1 .

선행발명 의 결합 또는 선행발명 내지 의 결합과 대비 3) 1, 4, 5 1 5

앞서 의 나 에서 이 사건 제 항 발명에 관하여 본 것과 같은 이유로 선행발명 5. . 1 ,

의 결합 또는 선행발명 내지 의 결합으로도 이 사건 제 항 발명의 진보성이 1, 4, 5 1 5 2

부정되지 아니한다.

소결 4)

이 사건 제 항 발명은 선행발명들에 의하여 진보성이 부정되지 아니한다 2 .

라 이 사건 제 내지 항 발명의 진보성 . 3 6

이 사건 제 내지 항 발명은 이 사건 제 항 발명의 돌외추출물을 포함하는 치료용 3 6 2

- 30 -

약학 조성물 또는 기능식품에 관한 발명으로서 이 사건 제 항 발명의 진보성이 부정, 2

되지 않는 이상 이 사건 제 내지 제 항 발명의 진보성도 부정되지 아니한다, 3 6 .

마 이 사건 제 항 발명의 진보성 . 7, 8

이 사건 제 항 발명은 효소 활성을 증가시키는 성분이 다물린 라는 7, 8 AMPK A, B

점에 기초하여 다물린 또는 다물린 중 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 것을 A B

특징으로 내세운 의약용도발명이다 그런데 선행발명 내지 은 어느 것도 다물린 . 1 6 A,

의 존재를 인식하거나 그것의 생리활성을 기재 또는 암시하고 있지 아니한바 통상의 B ,

기술자가 선행발명 선행발명 의 결합 선행발명 선행발명 과 의 결합1, 1, 2, 3 , 6, 1 6 ,

선행발명 의 결합 선행발명 내지 의 결합에 의하여 차이점 를 쉽게 극복할 1, 4, 5 , 1 5 5

수 있다고 보기 어려우므로 이 사건 제 항 발명도 그 진보성이 부정되지 아니한다, 7, 8 .

바 소결론 .

이 사건 특허발명은 진보성이 없다는 원고의 주장은 모두 이유 없다 .

이 사건 제 내지 항 발명의 명확성 요건 충족 여부6. 2 8

가 관련 법리 .

특허법 제 조 제 항 제 호는 청구범위에는 발명이 명확하고 간결하게 적혀야 한42 4 2

다고 규정하고 있다 그리고 특허법 제 조는 특허발명의 보호범위는 청구범위에 적혀 . 97

있는 사항에 의하여 정하여진다고 규정하고 있다 따라서 청구항에는 명확한 기재만이 .

허용되고 발명의 구성을 불명료하게 표현하는 용어는 원칙적으로 허용되지 아니한다, .

또한 발명이 명확하게 적혀 있는지는 통상의 기술자가 발명의 설명이나 도면 등 기재

와 출원 당시의 기술상식을 고려하여 청구범위에 기재된 사항으로부터 특허를 받고자

하는 발명을 명확하게 파악할 수 있는지에 따라 개별적으로 판단하여야 하고 단순히 ,

- 31 -

청구범위에 사용된 용어만을 기준으로 하여 일률적으로 판단하여서는 안 된다 대법원 (

선고 후 판결 참조2017. 4. 7. 2014 1563 ).

나 이 사건 제 항 발명 . 2

천연물 추출물은 채취방법 수확 후 건조방법 추출방법 등에 따라 성분과 함량이 , ,

달라질 수 있어 물리적 정성 정량적인 성질 추출물을 분리하기 위한 구체적인 , , ① ․ ②

제법 구체적인 조성성분으로 한정하거나 위 형식 중 둘 이상을 혼합하는 방식, , ③ ④

으로 특정하는 것이 보통이다.18)

앞서 본 바와 같이 이 사건 제 항 발명은 돌외추출물 에 관한 발명으로서 물건의 2 “ ”

발명이고 구성요소 은 추출물 분리에 관한 것은 아니지만 추출물의 제조방법을, 2-1 ,

구성요소 는 조성성분을 한정한 것으로 볼 수 있다 구성요소 은 고온고압반응 2-2 . 2-1

처리 방법을 온도 압력 시간으로 한정하고 있고 구성요소 는 그로써 얻은 추출물 , , , 2-2

조성을 유효지표성분인 다물린 의 함량 범위로 대표하여 한정하고 있는바 통상의 A, B ,

기술자는 이 사건 제 항 발명이 보호받으려는 사항을 명확히 파악할 수 있다고 봄이 2

타당하다 따라서 이 사건 제 항 발명은 청구항의 명확성 요건을 충족한다. 2 .

다 이 사건 제 내지 항 발명 . 3 6

이 사건 제 내지 항 발명은 이 사건 제 항 발명의 돌외추출물을 포함하는 치료용 3 6 2

약학 조성물 또는 기능식품에 관한 발명으로서 이 사건 제 항 발명이 명확히 기재된 , 2

이상 이 사건 제 내지 제 항 발명도 , 3 6 청구항의 명확성 요건을 충족한다.

라 이 사건 제 항 발명 . 7, 8

이 사건 제 항 발명은 하기 1) 7 “ 화학 구조식 생략 의 다물린 또는 다물린 의 화( ) A B

18) 특허청 기술분야별 심사실무가이드 이하 심사실무가이드라 한다 쪽 참조 , , 2020( ‘ ’ ), 5213-5215 .

- 32 -

합물 중 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 비만 당뇨 또는 고,

지혈증의 개선 및 치료용 약학 조성물 로서 의약용도발명에 해당한다 위 의약용도발” .

명을 구성하는 요소로서 특정 물질은 다물린 또는 다물린 화합물 중 하나 이상‘ ’ ‘ A B ’,

그것이 가진 의약용도는 비만 당뇨 고지혈증 개선 및 치료인바‘ ’ ‘ , , ’ , 통상의 기술자는

이 사건 제 항 발명이 보호받으려는 사항을 명확히 파악할 수 있다7 .

이에 대하여 원고는 이 사건 제 항 발명의 2) , 7 “다물린 또는 다물린 의 화합물 A B

중 하나 이상 부분은 분리된 이라는 한정이 없어 추출물에서 분리된 다물린 를 ” “ ” ‘ A, B’

뜻하는지 분리되지 않고 추출물 중에 존재하면서 약리활성을 나타내는 유효성분으로, ‘

서의 다물린 를 뜻하는지가 불명확하다는 취지로 주장한다A, B’ .

그러나 원고의 위 주장은 다음과 같은 점에서 받아들일 수 없다 .

가 유기화합물은 원칙적으로 화합물명이나 화학구조식으로 특정하여 기재한다 ) .19)

이 사건 제 항 발명은 다물린 또는 다물린 라는 화합물명과 그 화학 구조식을 7 “ A B”

명확하게 기재하고 있어서 통상의 기술자가 의약용도발명의 특정 물질이 무엇인지를 ,

파악할 수 있다 다물린 가 유효성분으로 작용하기 위한 함량이 반드시 기재되어. A, B

야 한다고 볼 수도 없다.

나 천연물에서 분리된 화합물이라 하여 분리된 같은 표현을 부가해야 한다고 ) “ ”

볼 이유가 없다 그러한 한정이 있든 없든 특정 물질의 구조나 성질은 바뀌지 않는다. .

다 다물린 가 돌외추출물에 함유되어 있다고 하더라도 그것이 활성에 ) A, B AMPK

영향을 주는 유효성분일 수 있다는 점은 이 사건 특허발명 전에는 밝혀지지 않았고,

이 사건 제 항 발명은 그러한 점에 기초하여 의약의 용도를 청구한 것이다7 .

19) 심사실무가이드 쪽 , 5212 .

- 33 -

라 이 사건 제 항 발명이 개방형 함유하는 으로 기재되어 있기는 하나 의약품 ) 7 (“ ”) ,

을 만들 때는 유효성분 외에 부형제 를 첨가하게 되는 점 등을 고려하면 위와 ( )賦形劑

같은 기재가 허용될 수 없다고 보기 어렵다 이 사건 제 항 발명은 추출물이나 특정한 . 7

화합물을 보호받으려는 것이 아니므로 위와 같이 기재되었다 하여 특정 물질과 의약,

용도로 구성된 범위를 넘어서 예컨대 다물린 자체나 다물린 외의 화합물, A, B , A, B

로까지 보호범위가 확장되는 것은 아니다.

3) 이 사건 제 항 발명이 명확히 기재된 이상 실질적으로 동일한 의약용도발명인 7 ,

이 사건 제 항 발명도 8 청구항의 명확성 요건을 충족한다.

마 소결론 .

이 사건 특허발명의 청구범위가 불명확하다는 원고의 주장은 모두 이유 없다 .

이 사건 제 항 발명의 기타 명세서 기재요건 충족 여부7. 7, 8

가 관련 법리 .

특허법 제 조 제 항에 따르면 특 1) 42 3 , 허출원서에 첨부하는 명세서의 발명의 설명‘ ’

에는 통상의 기술자가 해당 발명을 명세서 기재에 의하여 출원 시 기술수준으로 보아

특수한 지식을 부가하지 않고서도 정확하게 이해할 수 있고 동시에 재현할 수 있도록

목적 구성 작용 및 효과를 기재하여야 한다 특히 약리효과의 기재가 요구되는 의약. ․ ․

용도발명에서는 출원 전에 명세서에 기재된 약리효과를 나타내는 약리기전이 명확히

밝혀졌다는 등 특별한 사정이 없다면 특정 물질에 그와 같은 약리효과가 있다는 것을

약리데이터 등이 나타난 시험례로 보이거나 이를 대신할 수 있을 정도로 구체적으로

기재하여야만 비로소 발명이 완성되었다고 볼 수 있는 동시에 명세서 기재요건을 충족

했다고 볼 수 있다 대법원 선고 후 판결 참조( 2004. 12. 23. 2003 1550 ).

- 34 -

특허법 제 조 제 항 제 호는 청구항이 발명의 설명에 의하여 뒷받침될 것을 2) 42 4 1 ‘ ’

규정하고 있는데 이는 발명의 설명에 기재되지 않은 사항이 청구항에 기재됨으로써 , ‘ ’

출원자가 공개하지 아니한 발명에 대해 특허권이 부여되는 부당한 결과를 막으려는 데

취지가 있다 따라서 특허법 제 조 제 항 제 호가 정한 위와 같은 명세서 기재요건을 . 42 4 1

충족하는지는 위 규정 취지에 맞게 특허출원 당시 기술수준을 기준으로 통상의 기술자

입장에서 청구범위에 기재된 발명과 대응되는 사항이 발명의 설명에 기재되어 있는지‘ ’

에 따라 판단하여야 하므로 특허출원 당시 기술수준에 비추어 발명의 설명에 개시된 , ‘ ’

내용을 청구범위에 기재된 발명의 범위까지 확장 또는 일반화할 수 있다면 청구범위는

발명의 설명에 의하여 뒷받침된다고 볼 수 있다 대법원 선고 후‘ ’ ( 2016. 5. 26. 2014

판결 대법원 선고 후 판결 등 참조2061 , 2020. 8. 27. 2017 2864 ).

나 구체적 판단 .

앞서 인정한 사실 앞서 든 증거 갑 제 내지 호증 각 기재 이 법원에 현저한 , , 39 44 ,

사실 및 변론 전체 취지를 종합하여 알 수 있는 다음 사정에 비추어 보면 이 사건 제,

항 발명은 명세서 기재의 실시가능성 및 뒷받침 요건을 충족한다고 봄이 타당하다7, 8 .

는 세포 내의 1) AMPK[Adeonsine Monophosphate(AMP)-activated protein kinase]

에너지 상태를 감지하고 조절하는 효소로 에너지가 부족하거나 배고픔을 느끼면 활성,

화되어 에너지 균형을 회복하는 역할을 한다 세포는 에너지를 얻기 위해 에너지 통화. ‘

라고도 불리는 를 분해하고 가 (energy currency)’ ATP(Adenosine Triphosphate) , ATP

분해되면 수준이 상승하여 세포 내에 AMP [ATP ADP(Adenosine Diphosphate) AMP] → →

에너지가 부족하다는 신호로 작용한다 증가는 를 활성화시켜 지방산 베타 . AMP AMPK

산화를 촉진하고 에너지 생성 체지방 감소 세포 내 포도당 수송체( , ), (GLUT4; glucose

- 35 -

합성을 늘려 세포 내로의 포도당 흡수를 증가시킨다 혈당 저하transporter 4) ( ). AMPK

는 세포 내에서 포도당 분자를 분해하여 에너지 를 생산하는 과정인 해당작용(ATP)

을 촉진하는 한편 지방산 합성에 관여하는 (glycolysis) , ACC(Acetyl-CoA Carboxylase)

효소와 콜레스테롤 합성 효소인 의 활성을 억제하여 지방산과 콜레스테롤 , HMG-CoA ,

합성을 감소시킨다 결국 활성화는 세포가 에너지를 저장하는 대신 사용하도록 . AMPK

촉진한다.

이 사건 특허발명 명세서도 식별번호 실시례 2) [0003~0007, 0044~0053( 3, 4, 5)]

등에서 여러 문헌과 실험데이터를 들어 위 과정을 설명하고 있다 이 사건 특허발명 .

출원 당시의 기술수준에 비추어 볼 때 통상의 기술자는 누구라도 그와 같은 명세서 ,

기재로부터 다물린 가 A, B 효소의 활성을 증가시킨다면 그것이 지방산 산화를 AMPK

촉진하고 지방산 및 콜레스테롤 합성을 억제하여 비만 고지혈증을 개선하는 효과를 ,

가지리라는 점 포도당의 세포 내 흡수 증가는 혈당을 낮추어 당뇨 증상 관리를 도우,

라는 점을 인식할 수 있을 것이다 선행발명 명세서의 식별번호 실시례 . 1 [0109~0133(

에도 활성에 따른 위와 같은 약리효과가 3~6)] , AMPK 여러 문헌 및 실험데이터와 함께

구체적으로 기재되어 있다.

따라서 통상의 기술자는 이 사건 특허발명 출원 당시 기술수준에서 특수한 지식

을 부가하지 않고 명세서 기재만으로도 이 사건 제 항 발명을 정확하게 이해하고 7, 8

동시에 재현할 수 있으며 발명의 설명에 개시된 약리효과를 이 사건 제 항 발명의 , 7, 8

의약용도발명에까지 확장 또는 일반화할 수 있다고 봄이 타당하다.

이에 대하여 원고는 이 사건 특허발명 출원일 이후에 발간된 문헌들을 근거로 3)

이 사건 특허발명 출원 당시 활성화가 바로 항비만 항당뇨 효과를 갖는다는 ‘ AMPK ,

- 36 -

약리기전은 확립되어 있지 않았다고 주장한다 그러나 위 문헌들에서 원고가 지적하는 ’ .

부분은 원고의 주장을 뒷받침한다고 보기 어렵다.

예컨대 원고는 종설 논문 인 갑 제 호증에서 , (review article) 42 “However, it is not

라는 문always clear whether the effects of these agents are mediated by AMPK.”

장20)을 맥락 없이 떼어 활성화제의 효과가 에 의해 매개되는지 여부는 ‘AMPK AMPK

항상 명확하지 않았다로 옮긴 뒤 이것이 활성화와 약리효과 사이의 불확실한 ’ , AMPK

관계를 언급한 것이라고 주장한다 그런데 위 문장은 바로 앞 문장. 21)에 언급된 메트포

르민 티아졸리딘디온 디옥시글루코오스 등 실제(metformin), (TZDs), 2- (2-deoxyglucose)

로는 간접적으로만 를 활성화하는 약제들이 나타내는 효과가 에 의해 매개AMPK AMPK

되는지가 언제나 분명한 것만은 아니라는 내용에 불과하다 위 약제들의 외견상 . AMPK

활성과 관련된 것으로 보이는 효과는 직접적으로 활성화에 따른 것인지 아니면 AMPK ,

다른 경로를 통한 것인지가 불분명한 때가 없지 않으므로 가 (“it is always not clear”

아니라 이다 분자적 수준의 기전을 약제별로 추가로 규명할 “it is not always clear” ),

필요가 있다는 것이다 즉 활성의 약리기전 자체를 부정한 것이 아니다 오히려 . , AMPK .

위 논문은 쪽에서 의 약리기전을 일반적으로 정리하고 있고 위 문장도 그 2~3 AMPK ,

기전이 이미 어느 정도 정립되었음을 전제로 한 서술이다 뒤에서 보는 바와 같은 . 위

논문 를 보더라도 활성화가 지방산 콜레스테롤 합성을 억제하고Figure 2 AMPK , [fatty

등 지질 합성 은 동화 합성 경로 에 acids, cholesterol (lipogenesis) , (anabolic pathways)

20) Joungmok Kim et al., “AMPK activators: mechanisms of action and physiological activities”, Experimental &
Molecular Medicine 쪽, 48, 2016, 8 .

21) “Most of the current agents that have been shown to activate AMPK in physiological trials, such as
metformin, TZDs and 2-deoxyglucose, are indirect activators that inhibit oxidative phosphorylation and
glycolysis, thereby increasing the ADP(AMP):ATP ratio.”

- 37 -

빨간 줄 로 표시 포도당 흡수와 해당작용은 촉진한다는(negative) ], [glucose uptake,

는 이화 분해 경로 에 파란 줄 로 표시 앞서 본 glycolysis , (catabolic pathways) (positive) ]

것과 같은 내용이 명확하게 표시되어 있다.

갑 제 호증 외에 원고가 근거로 든 나머지 문헌들도 활성의 효과를 부정 42 AMPK

한 것으로는 볼 수는 없고 원고 주장은 위와 같이 부분적 지엽적 표현을 자의적으로 , ,

해석한 것에 근거하고 있어서 받아들일 수 없다.

다 소결 .

이 사건 제 항 발명 명세서 기재의 실시가능성 및 뒷받침 요건에 관한 원고의 7, 8

주장은 이유 없다.

이 사건 제 항 발명의 성립성 유무8. 7, 8

가 관련 법리 .

특허를 받을 수 있는 발명은 완성된 것이어야 한다 통상의 기술자가 반복 실시할 .

수 있고 발명이 목적하는 기술적 효과의 달성 가능성을 예상할 수 있을 정도로 구체,

갑 제 호증 의 생리학적 역할 요약42 Figure 2 AMPK

- 38 -

적 객관적으로 구성되어 있으면 발명은 완성되었다고 보아야 한다 발명이 완성되었는, .

지는 청구범위를 기준으로 출원 당시의 기술수준에 따라 발명의 설명에 기재된 발명의

목적 구성 작용효과 등을 전체적으로 고려하여 판단하여야 하고 반드시 발명의 설명 , , ,

중 구체적 실시례에 한정하여 인정되는 것은 아니다 대법원 선고 후( 2013. 2. 14. 2012

판결 대법원 선고 후 판결 등 참조3312 , 2019. 1. 17. 2017 523 ).

나 구체적 판단 .

원고는 다물린 는 천연 돌외잎에 존재하는 자연적 산물이어서 이 사건 제 , ‘ A, B 7, 8

항 발명의 성립성이 부정된다는 주장도 한다 그러나 앞서 본 바와 같이 이 사건 제’ . 7,

항 발명은 의약용도발명으로서 다물린 라는 화합물 자체를 보호받으려는 것이 8 A, B

아니므로 다물린 가 자연적 산물인지와 무관하게 원고의 위 주장은 이유 없다, A, B .

나아가 이 사건 특허발명 명세서에는 유효성분으로서 다물린 의 구조가 명확히 A, B

제시되어 있고 그 화합물이 나타내는 약리효과도 기재되어 있으므로 통상의 기술자는 , ,

그 출원 당시의 기술수준에 비추어 이 사건 제 항 발명을 반복 실시할 수 있고 그 7, 8 ,

기술적 효과의 달성 가능성을 예상할 수 있을 것이다.

따라서 이 사건 제 항 발명은 완성되었다고 봄이 타당하다 7, 8 .

결론9.

이 사건 특허발명에 등록을 무효로 할 사유가 있다고 인정되지 아니하므로 이 사건

심결은 적법하다 이 심결 취소를 구하는 원고의 청구는 이유 없어 기각한다. .

- 39 -

재판장 판사 문주형

판사 권보원

판사 한지윤

- 40 -

별지 [ 1]

이 사건 특허발명의 주요 내용

기술분야

[0001] 본 발명은 돌외추출물을 고온고압으로 처리하여 활성화 유효성분인 다물린 AMPK A

및 다물린 의 함량을 증가시킨 새로운 조성의 돌외추출물을 제조하는 방법에 관한 것이다B .

[0002] 또한 본 발명은 다물린 및 다물린 의 함량이 증가된 새로운 조성의 신규 돌외추 A B

출물을 비만 당뇨 고지혈증 등을 포함하는 대사질환의 효율적인 치료 및 개선 용도로 사용, ,

하는 방법에 관한 것이다.

배경기술

[0003] 는 의 서브유닛 으로 구성된 헤테AMPK(AMP-activated protein kinase) , , (subunit)α β γ

로트라이머 단백질로서 주로 근육세포에 많이 존재하며 이외에도 뇌 심장 지(heterotrimer) , , ,

방 조직 및 간에도 존재하는 효소로서 의 작용은 세포 내에서 에너지 준위를 감지하는 AMPK

중요 센서이며 또한 이 결과에 따라 식욕조절 체중조절 혈당조절 및 혈중지질대사 조절 등, , ,

에 핵심 역할을 한다.

[0005] 인산화 형태의 는 를 소비하는 생화학 반응인 지방산 및 콜레스테롤의 합성AMPK ATP

을 억제하게 되며 반대로 를 생성하는 지방산의 베타 산화 과정과 해당작용, ATP ( -oxidation) β

을 활성화시키게 된다 뿐만 아니라 세포막의 포도당 흡수 통로인 글루코스 트랜(glycolysis) .

스포터 의 양을 증가시키게 된다 한편 의 활성화는 인4(glucose transporter 4, GLUT4) . AMPK

슐린의 작용에 따른 신호전달기작과 상관없이 세포 내 포도당 흡수 통로인 의 PI3K GLUT4

세포막 이동을 증가시키게 된다 또한 가 인산화에 의해 활성화가 되면 또 다른 하위 . AMPK

단백질인 콜레스테롤 합성의 핵심 효소인 환원효소HMG-CoA (hydroxymethylglutaryl-CoA

에 대한 인산화가 일어난다 이 결과 환원효소의 불활성화가 일어나게 reductase) . HMG-CoA

되어 콜레스테롤 합성이 저하되게 되므로 혈중 콜레스테롤이 감소된다.

[0006] 또한 인산화가 일어나 활성화된 형태의 효소는 그 하위 작용 단백질로서 지방AMPK

산 합성의 핵심 효소인 의 세린 잔기에 대한 인산화를 ACC(acetyl-CoA carboxylase) (Ser)-79

일으켜 이 효소의 활성을 억제하게 된다 이 결과 의 활성화에 의해서 지방산 합ACC . AMPK

성의 핵심 대사산물인 말로닐 생성이 저하되어 지방산의 합성이 억제되게 -CoA(malonyl-CoA)

된다 활성화로 말로닐 감소가 일어나면 미토콘드리아 내로 지방산인 롱 체인 아. AMPK -CoA

실 가 유입되어 베타 산화가 촉진된다 높은 농도의 말로닐-CoA(long chain acyl-CoA) . -CoA

존재 상태에서는 롱 체인 아실 를 미토콘드리아로 전달하는 -CoA CPT1(carnitine palmitoyl-

- 41 -

이 억제되고 있는데 활성화로 말로닐 의 농도가 저하되게 되어 CoA transferase) , AMPK -CoA

이 저해 작용이 해제되면서 미토콘드리아 내로 롱 체인 아실 형태의 지방산들의 유입이 -CoA

증가되면서 베타 산화가 증가되므로 체지방 및 혈중 중성 지질의 감소가 일어나게 된다.

[0007] 한편 의 활성화는 AMPK PGC-1 (Peroxisome proliferator-activated receptor gamma α

에 대한 인산화를 일으키며 또한 히스톤 디아세틸라아제coactivator-1 ) (histone deacetylase)α

의 일종인 을 활성화시킨다 이 결과 와 SIRT1(Silent Information Regulatory T1) . AMPK SITR1

에 의한 의 인산화 및 탈아세틸화에 의해 미토콘드리아 대사가 활발히 일어나 당뇨 PGC-1 , α

및 비만 개선 효과가 나타나게 된다(Canto and Auwerx, Curr. Opin. Lipidol. 20, 98-105,

등2009; Canto , Nature 그러므로 활성화는 체내 지 방산 및 458, 1056-1060, 2009). AMPK [ ]

콜레스테롤 합성 억제 그리고 체지방의 베타 산화 및 혈중 포도당의 세포 흡수 등 작용을 [ ]

촉진하기 때문에 를 활성화하는 물질은 비만 당뇨 및 고지혈증의 개선이나 치료에 매AMPK ,

우 효과적으로 사용될 수 있다.

[0009] 한국공개특허 에는 돌외추출물이 2008-0003931 AMP-activated protein kinase(AMPK)

활성을 증가시켜 인슐린 저항성 비만 그리고 고지혈증 등을 포함하는 대사질환을 개선시킬 ,

수 있음을 시사하는데 이에 대해 본 발명에서 돌외추출물의 성분을 분석한 결과 다물린 와 A

다물린 라는 물질이 돌외추출물에서 활성에 영향을 주는 것으로 확인되었다 또한 B AMPK .

본 발명의 기술을 이용하여 제조한 다물린 및 다물린 함량이 증가된 새로운 조성의 신A B

규 돌외추출물은 기존 돌외추출물에 비해 의 인산화 능력 및 효소 활성화 능력이 증가AMPK

된 것으로 확인되었다.

해결하고자 하는 과제

[0010] 본 발명은 돌외추출물로부터 분리된 신규 화합물인 다물린 혹은 다물린 가 포함A B

된 비만 당뇨 고지혈증 등의 대사질환 개선 및 치료 효과를 나타내는 조성물을 제공하는 , ,

데에 있다.

[0011] 본 발명의 또 다른 목적은 다물린 혹은 다물린 의 양이 증가된 비만 당뇨 고지A B , ,

혈증 등의 대사질환 개선 및 치료 효과를 나타내는 신규 돌외추출물 및 이를 포함하는 의약

품 건강기능식품 또는 기능식품을 제공하는 데에 있다, .

과제 해결수단

[0012] 본 발명에서는 돌외추출물로부터 신규 담마란계 사포닌 물질인 AMP-activated

효소 활성화 능력을 갖는 다물린 로 명명된 protein kinase(AMPK) A(damulin A) 2 ,3 ,12α β β

-trihydroxydammar-20(22)-E,24-diene-3-O-[ -D-glucopyranosyl-(1 )- -D-glucopyranoside] β → β

- 42 -

및 다물린 로 명명된 B(damulin B) 2 ,3 ,12 -trihydroxydammara-20,24-diene-3-O-[ -D- α β β β

를 주 고성능 액체 크로마토그래피glucopyranosyl-(1 )- -D-glucopyranoside] HPLC[ : (High- → β

및 주 핵자기 공명Performance Liquid Chromatography)] NMR[ : (Nuclear Magnetic

방법을 이용하여 분리 및 분석하였고 구조는 하기 화학식과 같다Resonance)] .

[0015] 다물린을 분리하기 위한 돌외잎 추출물을 제조하기 위해서는 먼저 건조된 돌외잎을

배 부피의 에탄올 수용액 바람직하게는 에탄올 수용액 추출한 뒤 차 상층액10~20 ( 20~80% ) 1

을 수거한다 남은 돌외잎 잔유 침지물에 다시 에탄올 수용액 바람직하게는 에탄올 . ( 20~80%

수용액 을 배 가하고 에서 시간 추출하여 차 상층액을 얻고 차 및 차 ) 6~20 65~95 1~8 2 1 2℃

상층액을 합친 후 거즈를 이용하여 여과를 시키고 얻어진 액을 다시 에서 원800~1,500 x G

심분리하여 부유물을 제거한다 얻어진 추출액을 감압농축하여 브릭스 로 농축한 . 40~70 (Brix)

후 얻은 돌외추출물 농축액 이하 라 칭함 을 다시 고온고압 조건에서 다물린 함량이 ( , ‘TG1022’ )

높아진 신규 돌외추출물 농축액 이하 라 칭함 을 얻을 수 있다( , ‘TG1022F’ ) .

[0016] 다물린 함량이 높아진 신규 돌외추출물 을 얻기 위해서는 고온 및 고압의 유(TG1022F)

지가 필요한데 이를 위해서 상업적으로 이용되는 일반적인 고온고압 또는 고온고압살균 장

치가 부착된 발효조 및 추출기를 이용할 수 있다.

[0017] 상기 신규 돌외추출물은 온도가 높지 않은 초고압 상태에서도 생성할 수 있는데 초고

압 상태를 유지하기 위해서 상업적으로 판매되고 있는 초고압 반응기를 이용할 수도 있다.

예컨대 일본 동양고압사의 등을 사용할 수 있다 상기 신규 돌외추출물을 제조하기 , DFS-2L .

위한 바람직한 온도는 이고 바람직한 압력은 기압이다 반응시간은 바람직40~125 1.2~1100 . ℃

하게는 시간이다 이밖에 돌외추출물에서 다물린 와 다물린 함량을 높일 수 있는 0.1~24 . A B

방법으로는 고압 및 고온 조건 이외에도 초고주파 레인지나 오븐을 이용하는 것도 가능하다.

[0019] 본 발명의 돌외추출물에 고온 및 고압을 가한 신규 돌외추출물은 다물린 및 다물A

린 가 증가되어 당뇨병 비만 체지방 감소 그리고 혈중 중성지방 및 콜레스테롤을 감소시B , ,

키는 효과가 월등히 향상되는데 이러한 대사질환에 대한 치료 개선 또는 예방 효과를 위해,

Damulin A

화학식 1

Damulin B

- 43 -

서 다물린 및 다물린 의 함량이 건조 중량당 각기 본 발명의 새로운 조성의 신규 돌외추A B

출물 건조 고형분 중 유효지표성분인 다물린 의 함량은 에서 내의 범위이며 유용A 0.5% 10%

하게는 에서 범위이며 다물린 의 함량은 에서 내의 범위이며 유용하게는 0.7% 7% , B 0.3% 8%

에서 범위이다0.5% 6% .

효과

[0026] 다물린 및 다물린 의 함량이 증가된 신규 돌외추출물은 기존 돌외추출물에 비해 A B

의 인산화 능력 및 효소 활성화 능력이 매우 증가되게 된다AMPK .

[0027] 의 하부 타깃 단백질이며 지방산 생합성의 핵심 효소인 AMPK ACC(acetyl-CoA

의 인산화를 훨씬 증가시킬 수 있어서 이 결과 의 효소 활성을 저하시키는 carboxylase) , ACC

능력도 훨씬 강하게 나타내게 된다 따라서 궁극적으로는 다물린의 함량을 증가시킨 신규 돌.

외추출물 은 다물린 함량을 증가시키지 않은 원래의 돌외추출물 에 비해 체(TG1022F) (TG1022)

지방 합성 억제 능력 지방산의 베타 산화 촉진 능력 콜레스테롤 생합성 억제 능력 고지혈, , ,

증 치료 및 개선 효과 비만의 치료 및 개선 효과가 있고 인슐린 비의존적으로 세포 포도당 ,

운반체인 의 세포막 이동 능력을 매우 증가시킴에 따라 당뇨병 환자의 혈당을 효율적GLUT4

으로 저하시킬 수 있다.

[0028] 결과적으로 기존 돌외추출물에 비해 본 발명의 방법을 이용하여 제조한 다물린 와 A

다물린 함량이 높은 신규 돌외추출물이 비만 당뇨 고지혈증 등의 대사질환의 개선 또는 B , ,

치료 효과가 훨씬 우수하다고 할 수 있다.

발명의 실시를 위한 구체적인 내용

실시례 돌외추출물로부터 활성 물질인 다물린의 분리[0030] < 1. AMPK >

[0031] 건조된 돌외잎 을 에탄올 에 침지시킨 후 에서 시간 차 추출한 뒤 5 50% 50 90 6 1㎏ ℓ ℃

차 상층액을 수거하였다 남은 돌외잎 잔유 침지물에 다시 에탄올 를 가하고 1 . 50% 50 90ℓ ℃

에서 시간 추출하여 차 상층액을 얻었다 차 및 차 상층액을 합친 후 거즈로 여과하여 6 2 . 1 2

얻어진 액을 다시 1,000 x G에서 원심 분리하여 부유물을 제거하였다 얻어진 추출액을 감압.

농축하여 브릭스로 농축한 후 이를 활성 물질인 다물린 분리에 이용하였다50 AMPK .

[0032] 다물린의 순수 분리를 위하여 브릭스로 농축된 돌외추출물을 음이온 교환수 50 HP-20

지 가 충진된 칼럼 을 통과시킨 다음 일차적으로 (Mitsubishi Chemical Corporation) (20 x 65 ) , ㎝

물로 세척하고 그다음 의 메탄올을 통과시켜 세척한 후 다시 의 아세톤을 10 , 10 50% , 10ℓ ℓ ℓ

통과시켜 아세톤 분획을 얻어 농축하였다 이후 농축액에 물을 섞어 현탁시킨 후 다시 . 1.5ℓ

노르말 핵산 을 사용하여 각 번 추출한 핵산 층 에틸아세테이트로 1.5 (n-Hexane) 3 (200g), 1.5ℓ ℓ

- 44 -

각 번 추출한 에틸아세테이트 층 그리고 의 노르말 부탄올 로 각 번 3 (200g) 1.5 (n-butanol) 3ℓ

추출한 부탄올 층 을 얻었다(200g) .

[0033] 이들 중 근육세포 에서 인산화 증가에 따른 활성 능력이 L6 (L6 myotube cells) AMPK

가장 높은 부탄올 분리 층 을 실리카겔 사 칼럼 입자크기 에 (100g) (Merck ) (15x65 ; 63-200 )㎝ ㎛

초기 용매 혼합조성 비율을 클로로포름 : 메탄올 : 물 = 5 : 1 : 로 시작하여 최종 용매 혼합비0.1

율이 클로로포름 : 메탄올 : 물 = 0 : 1 : 의 농도 구배로 물질을 분리하여 전체 개의 분획0.1 5

을 얻었다(B.1-B.5) .

[0034] 이들 분획을 분석을 통해 확인한 결과 과 는 함유된 물질이 매우 유사하 HPLC B.3 B.4

여 이들 두 개의 분획을 합쳐서 분획을 새로이 만들었으며 이들을 다시 실리카B34 ODS-A

겔 사 칼럼 입자크기 에 통과시키고 물질 분리를 위한 용매로서 (Merck ) (6.5x65 ; 12 -150 )㎝ ㎚ ㎛

물과 메탄올 혼합비율이 초기에는 1 : 에서 최종 1 0 : 이 되도록 단계적 농도 구배를 사용하1

여 개의 분획을 얻었다 에서 6 (B.34-1 B.34-6).

[0035] 이들 중 세포에서 인산화 증가에 따른 활성화 능력이 가장 높은 분L6 AMPK B34-5

획을 를 이용해 자외선 측정기 를 사용하여 다시 물질을 분리하였다 이를 위해 HPLC (205 ) . ㎜

세미 프리퍼레이티브 칼럼- (semi-preparative column, RP-C18 Package column, 10×250m, 10

대한민국 을 사용하였고 시료의 유속은 분당 용매는 초기에는 particle size; RS Tech ) , 2 , ㎖

포름산 이 포함된 메탄올을 사용해 분 분리 후 다시 메탄올 0.1% (formic acid) 75% 75 , 100%

용매로 분 분리하였고 이 결과 의 다물린 및 의 다물린 가 각기 분리되었다15 14 A 10 B .㎎ ㎎

실시례 다물린 및 다물린 의 와 의 인산화 증가 효과[0044] < 3. A B AMPK ACC >

[0045] 의 인산화로 일어나는 활성화는 와 환원효소에 대해 인산화 증 AMPK ACC HMG-CoA

가를 일으켜 이 결과 와 환원효소의 활성을 저해한다 이에 따ACC HMG-CoA (Henin, 1995).

라 인산화로 지방산 생합성은 억제되게 되고 미토콘드리아에서 베타 산화가 증가되AMPK

며 간 조직에서는 지방 및 콜레스테롤의 합성이 저해된다 의 활성은 아미노산 번, . AMPK 172

의 트레오닌 잔기에 인산화가 증가하였는지 여부로 판단할 수 있다(Threonine) .

[0047] 따라서 단일물질로 분리된 다물린 를 농도로 다물린 는 A 10, 30, 60 / , B 1, 5, 10㎍ ㎖

농도로 각각 분화된 근육세포 에 시간씩 처리한 후 서/ L6 (L6 myotube cells) 2 AMPK ㎍ ㎖ α

브유닛의 트레오닌 잔기 및 효소 단백질의 번째 세린 잔기의 인산화 증-172 ACC 79 (Serine)

가 정도를 황 등(Hwang et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 의 방 371, 289-293, 2008)

법에 따라 웨스턴 블롯 분석을 통해 확인하였다 이 결과 다물린 및 다물린 의 처리로 . A B

근육세포 내의 및 의 인산화가 대조군에 비해 농도 의존적으로 각각 증가됨을 L6 AMPK ACC

- 45 -

확인하였고 도 및 도 참조 다물린 및 다물린 모두 의 인산화를 일으켜 활성( 3 4 ) A B AMPK

화되고 는 인산화되어 활성 저해를 일으키는 유효물질임을 확인할 수 있었다ACC .

실시례 다물린 및 다물린 의 지방산 베타 산화 촉진을 통한 지방감소 효과[0048] < 4. A B >

[0049] 를 활성화시키면 의 활성이 감소하게 되어 미토콘드리아 내의 말로닐 AMPK ACC -CoA

농도가 감소하게 된다 이에 따라 미토콘드리아 내로 지방산 유입이 증가되어 베타 산화가 .

증가하게 되므로 체지방 감소에 따른 비만 억제 효과가 나타나게 된다 배양된 근육세포. L6

에 순수 분리한 다물린 와 다물린 를 처리하여 A B

황 등의 방법(Hwang et al., Biochem. Biophys.

Res. Commun. 에 따라 지방산의 377, 1253-1258)

베타 산화 증진 효과를 조사하였다.

[0050] 이 결과 다물린 및 다물린 A(30 / ) B(5㎍ ㎖

로 인해 지방산의 베타 산화가 각각 배/ ) 1.8㎍ ㎖

와 배 증가되는 것이 관찰되었다 도 이 결2.6 ( 5).

과를 볼 때 다물린 및 다물린 는 체지방 감소 , A B

촉진을 통한 비만 억제 또는 치료 효능이 높은

물질임을 확인하였다.

실시례 다물린 및 다물린 의 세포 내 포도당 흡수 촉진 효과[0051] < 5. A B >

[0052] 의 활성화는 또한 세포 내로 포도당 흡수가 증가를 일으켜 혈당저하효과를 나 AMPK

타냄이 잘 알려져 있다(Hardie et al., FEBS Lett. 546, 113-120, 2003; Carling et al., Trends.

Biochem. Sci. 29, 18-24, 2004; Kahn et al., Cell Metab. 1, 15-25, 2005; Cool et al., Cell

Metab. 3. 403-416, 2006; Lee et al., Diabetes, 55, 2256-2264, 2006; Hwang et al.,

도 3 도 4

도 5

- 46 -

Biochem. Biophys. Res. Commun. 따라서 다물린 와 다물린 를 371, 289-293, 2008). A B L6

근육세포에 처리하여 세포 내 포도당 흡수 능력에 대한 영향을 조사하였다.

[0053] 배양된 근육세포를 황 등의 방법 L6 (Hwang et al., Biochem. Biophys. Res. Commun.

에 따라 고농도의 포도당과 함께377, 1253-1258) ,

세포 내에서는 분해가 일어나지 않는 방사선 동위

원소인 2-DG(2-deoxy-[3 를 첨가한 후 H]D-glucose)

다물린 와 다물린 로 인한 세A(30 / ) B(5 / )㎍ ㎖ ㎍ ㎖

포 내 흡수 촉진 정도를 조사하였다 이 결2-DG .

과 다물린 를 처리한 세포에서는 당 흡수 능력이 A

평균적으로 그리고 다물린 가 처리된 세포42%, B

에서는 정도 당 흡수가 증가되었다 도 참79% ( 6

조 이 결과 다물린 및 다물린 는 모두 혈당 ). A B

저하를 통한 항당뇨 효과가 우수함을 확인하였다.

실시례 고온 및 고압 처리로 다물린 함량이 증가된 돌외추출물의 제조[0054] 6.

[0055] 상기 실시례 및 에서 확인된 바와 같이 신규 화합물인 다물린 와 다물린 는 4 5 A B

활성화 및 이에 따른 활성 저해를 일으키는 유효물질로 밝혀졌다 그러나 단순 AMPK ACC .

돌외추출물 에는 다물린 및 다물린 의 함량이 유효효과를 나타낼 정도로 높지 않(TG1022) A B

은 편이었다 따라서 다물린 및 다물린 함량을 증가시킨 신규 조성의 새로운 돌외추출. A B

물 을 제조하였으며 상기 신규 돌외추출물 이 강력한 활성화 능력을 (TG1022F) (TG1022F) AMPK

갖는 것을 확인할 수 있었다.

[0056] 상기 신규 돌외추출물 농축액 은 단순 상온 상압 돌외 에탄올 추출물 (TG1022F)

에 고온 및 고압 반응 혹은 초고압 반응 등을 통해 제조하였다(TG1022) .

[0057] 고온고압 반응은 일반적인 고온고압 멸균기 혹은 초고압 반응기 (autoclave) (DFS-2L,

동양고압 일본 를 사용하여 돌외의 단순 추출물 농축액 에 고온고압 조건을 유지하게 , ) 30㎖

하였다.

[0058] 신규 돌외추출물 농축액 을 건조시켜 얻어진 건조물 내의 다물린 및 다물 (TG1022F) A

린 함량은 를 사용하여 분석하였다 이때 도 에서 나타난 순도를 갖는 분리된 다물B HPLC . , 1

린 및 다물린 를 표준품으로 사용하여 농도별 정량 표준곡선을 작성하여 시료의 각 피크 A B

면적비로부터 함량을 계산하였다 이 결과 고온 및 고압 혹은 시간을 달리한 조건에서 신규 .

돌외추출물 농축액 에서 다물린 와 다물린 의 함량은 각각 온도 압력 시간 등에 (TG1022F) A B , ,

도 6

- 47 -

비례해서 증가하였다 표 따라서 본 발명에서는 돌외추출물 농축액을 고온 및 고압을 함께 ( 2).

사용한 처리조건으로 가공하면 처리시간에 비례하여 다물린 및 다물린 의 함량이 월등히 A B

증가된 새로운 돌외추추물 농축액 을 제조할 수 있다 표 는 고온 고압 조건에서 (TG1022F) . 2 ,

돌외추출물에 포함된 다물린의 함량 증가를 나타내는 도표이다.

실시례 다물린 함량이 증가된 신규 돌외추출물의 및 인산화 증가 효과[0060] < 7. AMPK >

[0061] 실시례 의 방법으로 제조된 다물린 및 다물린 함량을 각기 및 로 6 A B 0.89% 0.68%

증가시킨 새로운 조성의 돌외추출물 의 신호전달계 활성화 증진 능력에 대한 (TG1022F) AMPK

농도 의존성을 근육세포들에서 조사하였다 이 결과 도 에 나타난 바와 같이 단순한 돌L6 . 7

외추출물인 는 농도로 처리하더라도 비처리 대조군과 유사하게 전혀 TG1022 120 / AMPK ㎍ ㎖

및 의 인산화를 일으키지 못하였다 그러나 다물린 및 다물린 함량이 각기 ACC . A B 0.89%

및 로 증가되도록 제조된 는 의 처리농도에서도 및 의 인산0.68% TG1022F 60 / AMPK ACC㎍ ㎖

화를 강하게 촉진시켰으며 및 로 처리농도를 증가시켰을 때 농도 의존적으, 90 / 120 /㎍ ㎖ ㎍ ㎖

로 및 인산화를 증가시켰다 특히 고온고압 처리하지 않은 단순한 돌외 주정 추AMPK ACC .

출물 농축액인 다물린 함량 다물린 함량 와 기압 시간 TG1022( A 0.37%, B 0.28%) 121 , 1.2 , 1℃

반응조건으로 고온고압 처리한 다물린 함량 다물린 함량 를 동TG1022F( A 0.89%, B 0.68%)

일한 농도로 처리하고 이들의 효과를 비교한 결과 다물린 함량을 증가시킨 의 TG1022F

표 2

- 48 -

및 인산화 능력이 다물린 함량이 증가되지 않은 에 비해 월등히 우수함AMPK ACC TG1022

을 확인하였다.

실시례 비만 동물 모델에서 신규 돌외추출물을 이용한 체중감소 효과[0062] < 8. >

[0065] 표 은 비만 생쥐 에서 다물린 및 다물린 함량이 증가된 새로운 조성의 3 (ob/ob) A B

신규 돌외추출물 다물린 함량 다물린 함량 투여에 의한 체중감TG1022F( A 0.89%, B 0.68%)

소 효과를 나타내는 도표이다.

실시례 신규 돌외추출물의 인체 체중 및 허리둘레 감소에 대한 효과[0069] < 10. >

[0070] 나이가 살부터 살 사이의 성인 남자 및 여자들에게 단순한 돌외추출물인 21 71

와 다물린 및 다물린 함량이 각기 및 로 증가된 를 매일 TG1022 A B 0.89% 0.68% TG1022F

각기 씩 주 동안 경구 투여하였다 이때 는 남녀 각각 명을 대상으로 경구 300 12 . , TG1022 10㎎

투여를 시켰으며 도 남녀 각각 명을 대상으로 경구 투여하였다 체중은 체중계를 , TG1022F 10 .

이용하여 측정하였고 허리둘레는 번째 갈비뼈 아래와 장골능 사이 중간 부위의 , 10 (iliac crest)

둘레를 측정하였다.

도 7

표 3

- 49 -

[0071] 이 결과 표 에 나타난 바와 같이 다물린 함량이 증가된 투여군에서는 남자 4 TG1022F

와 여자 시험군 모두에서 체중은 각기 평균 과 씩 감소하였고 허리둘레는 각기 평4.3 2.1㎏ ㎏

균 및 씩 감소하였다 반면 를 투여한 남자와 여자 시험군들에서 체중은 5.4 5.8 . TG1022㎝ ㎝

평균 및 씩 각기 감소하였고 허리둘레는 평균 와 씩 감소하였다 표 0.6 0.4 0.7 0.8 ( 7). ㎏ ㎏ ㎝ ㎝

이 결과에 따라 다물린 및 다물린 함량을 증가시킨 새로운 조성의 는 단순 돌A B TG1022F

외추출물인 에 비해 월등히 우수한 체중 및 체지방 감소 효과가 있음을 확인하였다TG1022 .

표 는 인체에서 다물린 및 다물린 함량이 증가된 신규 돌외추출물 의 체중 및 4 A B TG1022F

허리둘레 감소 효과를 나타내는 도표이다.

표 4

- 50 -

별지 [ 2]

선행발명 1. 1 인슐린 저항성 증후군 치료 “ ”–

기술분야

[0001] 본 발명은 돌외(Gynostemma pentaphyllum 추출물 또는 가이페노사이드) (gypenoside)

를 유효성분으로 함유하는 치료학적 조성물에 관한 것이다 추가적으로 본 발명은 인슐린 저. ,

항성 증후군 비만 또는 고지혈증의 치료용 조성물의 사용에 관한 것이다, .

배경기술

[0006] 비만은 형 당뇨병 및 고수준의 혈중 유리 지방산을 빈번하게 수반하고 이는 인슐린 2 ,

신호를 감소시키게 되므로 체지방을 감소시키는 것은 인슐린 내성 및 형 당뇨병의 개선에 , 2

유익하다 따라서 신체상 체지방의 어느 부분을 감소시키고 또는 어떻게 감소시키는가는 중.

요한 관심이 된다 의 활성화는 산화작용을 증가시키. AMPK(AMP-activated protein kinase) -β

는 동시에 체지방 합성을 감소시킬 수 있어 인슐린 저항성을 개선할 수 있다 활성화. AMPK

는 를 불활성화시켜 말로닐 코에이 생성을 감소시ACC(acetyl-CoA carboxylase) , - (malonyl-CoA)

키고 이로써 지방 생성은 감소시키고 산화는 증가시킨다 산화를 하기 위해서, - (Oh, 2005). -β β

는 지방산이 미토콘드리아로 이동되어야 한다 운반 시스템인 카르니틴 셔틀. (carnitine

은 긴 사슬 지방산이 미토콘드리아 막을 통과할 수 있게 한다 간 및 근육세포에서 shuttle) .

이 운반 시스템은 말로닐 코에이에 의해서 저해된다 그러므로 활성화에 의한 말로닐- . AMPK -

코에이 감소는 미토콘드리아로의 지방산의 전달을 증가시키고 그 결과 산화는 증가되어, - , β

체지방이 감소하게 된다.

[0011] 를 활성화시키는 화합물들을 비만 인슐린 저항성 증후군 또는 형 당뇨병 치료 AMPK , 2

를 위하여 스크리닝 방법 을 개발하여 탐색하게 되었다 아시아 지역에서 (screening method) .

수백 년 동안 다양한 질환 치료에 안전하게 사용되어 온 천연 식물 재료들이 근육세포에서

를 활성시키는지 여부를 검사하였다 시험된 수천 종의 식물 추출물 중에서 돌외AMPK . ,

(Gynostemma pentaphyllum 추출물이 인슐린 저항성 증후군의 치료에 가능한 후보 Makino)

물질로 선택되었다.

[0012] 돌외는 박과 (Cucurbitaceae 에 속하는 다년생 식물로서 이 식물의 추출물이 혈중 콜레)

스테롤을 낮추고 혈압을 조절하고 면역력을 강화시키며 염증 감소 혈소판 응집 등을 저해, , , ,

할 수도 있는 화합물 또는 활성 성분을 포함하는 것으로 간주하여 민간 치료약으로서 사용

되어 왔다 이 식물 잎 추출물의 주요 구성성분은 가이페노사이드 이며. (...) (gypenosides; GP) ,

이는 담마란계 사포닌이다 최근 류 등은 돌외로부터 종의 담마란계 (dammarane-type) . (Liu) 15

사포닌을 분리하였다 종은 이미 이전에 분리된 것이고 종은 에폭시 환이 있(Liu, 2004). 10 , 5

- 51 -

는 측쇄가 함유되어 있는 신규 트리테르페노이드 이다 인 등은 또한 C-17 (triterpenoid) . (Yin)

이 식물로부터 상기 종의 글리코사이드 중에서 종의 신규 담마란계 배당체19 15 (Glycosides)

로 밝혀졌다 이러한 최근의 신규 화합물 발견에 대한 성공적인 연구 결과는 현대적인 분석 .

도구들의 발달로 기인하였다 그러나 상기 신규 배당체의 각각 또는 조합이 임의의 특정한 .

약리학적 활성을 나타내는지 여부는 아직 밝혀지지 않았다.

[0013] 돌외추출물은 인슐린 저항성 증후군에 좋은 효과를 나타냈다 이러한 상기 돌외추출물 .

또는 가이페노사이드의 항 인슐린 저항성은 다음과 같은 두 가지 발견에 기초한다 첫째 이 - . ,

추출물은 활성을 자극시켜 인슐린 비의존적으로 의 세포막으로 이동을 촉진시키AMPK - GLUT4

는 자극제 이다 두 번째로 이 추출물은 저해제 와 (stimulator) . IKK(I-kB kinase )- JNK(c-Jun N- β

의 활성을 억제하여 의 세린 잔기 인산화를 감소시킨다는 것이다terminal kinase) IRS1 .

발명의 상세한 설명

[0014] 본 발명은 돌외 (Gynostemma pentaphyllum 로부터 유래된 담마란계 사포닌 Makino)

인 가이노페노사이드를 함유하는 생약 추출물의 사용법에 관한 것이다.

[0015] 본 발명의 또 다른 일 양태는 돌외추출물의 제조방법을 제공하는 것이다 이 제조방, .

법은 상기 식물 구성요소를 추출하고 상기 추출물을 건조함을 포함한다.

[0021] 본 발명의 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 가이페노사이드 함량은 중량, 0.5-10%

을 포함하며 바람직하게는 를 포함한다, 10-2000 / .㎍ ㎖

[0022] 본 발명은 또한 치료학적 유효성분의 상기 조성물을 인슐린 저항성 증후군 비만 또 ,

는 고중성지방혈증으로 고통 받는 환자에게 투여함을 포함하는 인슐린 저항성 증후군 비만 ,

또는 고중성지방혈증을 치료하는 방법에 관한 것이다 상기 추출물의 양은 내지 . 10 30 /㎎ ㎎

일 또는 약 내지 일으로 사용 가능하다0.5 5 / .㎎ ㎎

[0023] 본 발명의 또 다른 양태로서 본 발명은 치료학적 유효성분의 상기 조성물로부터 분,

리되는 가이페노사이드를 인슐린 저항성 증후군 비만 과체중 체지방 감소 및 고중성지방혈, / ,

증으로 고통받는 환자에게 투여함을 포함하는 인슐린 저항성 증후군 비만 과체중 체지방 감, / ,

소 및 고중성지방혈증을 치료하는 방법에 관한 것이다 상기 조성물의 양은 약 내지 . 1㎎

일 또는 내지 일으로 사용 가능하다1000 / 10 800 / .㎎ ㎎ ㎎

[0031] 바람직한 구현례의 상세한 설명란[ ]

[0035] 본원에서 정의되는 는 돌외로부터 추출한 가이페노사이드를 의미한다 “GP” .

추출 조성물 및 제형[0041]

[0042] 본 발명의 치료 조성물 중 가이페노사이드의 함량은 약 내지 중량 또는 0.5 10% 0.6

내지 내지 내지 내지 내지 내지 이고 더욱 바람직9%, 0.7 8%, 0.8 7%, 0.9 6%, 1 5%, 2 4% ,

- 52 -

하게는 내지 내지 내지 내지 내지 내지 2.1 3.5%, 2.2 3.4%, 2.3 3.3%, 2.4 3.2%, 2.5 3%, 2.6

또는 내지 내의 범위일 수 있다2.9%, 2.7 2.8% .

[0043] 본 발명 치료용 조성물에서의 가이페노사이드 농도는 내지 내지 10 2000 / , 20 ㎍ ㎖

내지 이고 바람직하게는 내지 내의 범위일 수 있다1000 / , 30 500 / , 100 300 / .㎍ ㎖ ㎍ ㎖ ㎍ ㎖

실시례 가이페노사이드 제조방법[0094] 1.

[0095] 이 구현례에서는 본 발명은 돌외추출물의 제조방법을 상술한다 .

[0096] 상기 제조방법에 있어서 특정 유형의 항고혈당 활성을 갖는 돌외추출물을 선택하였 ,

다 추출물은 본 발명의 생약 추출물에 기초한 조성물상에 활성 성분을 포함하는 약학적인 .

활성 화합물을 고농도로 갖는 추출물을 수득하였다.

[0097] 본 발명의 하나의 구현례로서 상기 방법은 하기의 단계를 포함한다 , :

[0098] 마쇄된 돌외잎을 수성 알코올 에탄올과 같은 에서 추출하는 단계 (a) (70% ) ;

[0099] 단계를 반복하고 두 번째 수용성 알코올 추출물 용출액을 회수하고 및 (b) (a) , , (a),

단계에서 획득한 두 알코올 추출물을 합치는 단계(b) ;

[0100] 알코올을 증발시킨 후 상기 용액을 증류수와 추가적으로 혼합하고 여과하는 단계(c) ;

[0101] 상기 용액을 부탄올 물층과 혼합한 후에 부탄올을 증발시키는 단계(d) 1- (1-BuOH), 1- ;

[0102] 건조하여 상기 회수된 용출액의 액상 부분을 감소시켜 유기성 물질들을 회수하고 (e) ,

돌외추출물 분말형태를 제조하는 단계 및;

[0103] 필요에 따라서 추가적인 분리 및 정제하는 단계 (f) .

실시례 가이페노사이드의 고농도 또는 유리 지방선에 의해 유도된 인슐린 저항성[0109] 3.

의 완화(in vitro)

[0110] 는 인산화를 통해 및 환원효소 를 직접적으로 조절하며AMPK ACC HMG-CoA (reductase)

이는 각각 미토콘드리아에서의 산화를 증가시키고 간 조직에서의 콜레스테롤 (Henin, 1995), -β

합성을 저해한다 의 유사체인 . AMP AICAR(5’-phosphoribosyl-5-aminoimidazole-4-carboxamide)

는 를 활성화시키는 것으로 알려져 있다AMPK .

[0111] 상기 실시례 에서 가이페노사이드는 세포막으로의 이동을 증진시켰다 인슐린1 , GLUT4 .

의 작용 이외에 근육 수축은 활성화를 통한 이동을 촉진시키는 것으로 알려져 AMPK GLUT4

있다 가이페노사이드 처리가 활성을 활성화시키는지 여부를 확인하기 위해서 미오. AMPK L6

튜브 세포에 가이페노사이드를 처리하였다 활성은 특이적인 항체를 이용하여 의 . AMPK AMPK

번 트레오닌 잔기에서의 인산화 증가로 평가하였다 의 인산화는 미오튜브 세포172 . AMPK L6

에서 가이페노사이드를 처리한 후 시간 이내에 나타났고 도 그러한 인산화 수준은 가이페2 ( 5)

노사이드의 처리시간이 연장되어도 증가되지 않았다 미오튜브 세포는 인슐린 저항성을 유. L6

- 53 -

도하고 활성을 억제하기 위해 고농도 포도당 으로 전처리하였다AMPK (27.5mM) (Itani, 2003).

가이페노사이드의 처리에 따라 트레오닌 잔기에서의 인산화가 현저히 증가하였다 고AMPK .

농도의 가이페노사이드 처리는 의 더 많은 인산화를 유도하였다 이 결과는 가이페노사AMPK .

이드가 처리된 인슐린 민감성 세포에서 활성이 증가되었음을 의미한다 도 및 도 AMPK ( 5 6).

[0112] 세포를 낮은 혈청 조건에서 성숙한 근육세포로 분화시켰다 를 양성 대조군 L6 . AICAR

으로 사용하였다 일단 약물 처리가 종료되면 세포들을 회수하여 분해시켰고 개개 처리군으. , ,

로부터 동량의 단백질 및 활성 수준을 분석하였다 도 참조 단백AMPK p38 MAPK ( 7 ). AMPK

질에 대한 면역 블로팅하였다 가이페노사이드 처리군에서는 비처리군과 비교하여 . 30 /㎍ ㎖

의 번째 트레오닌 잔기에서의 인산화 증가가 나타나지 않았다 그러나 가AMPK 172 . 60 /㎍ ㎖

이페노사이드 처리군에서는 의 인산화 수준이 유의적으로 증가하였다 에 AMPK . 1mM AICAR

의한 인산화 수준은 가이페노사이드 처리군의 인산화 정도와 비슷하였다 가AMPK 60 / . ㎍ ㎖

이페노사이드는 공통의 골격구조를 공유하는 유사 화합물들의 혼합물이다 가이페노사이드는 .

가이페노사이드 평균 분자량이 약 달톤이라고 간주하고 를 활성화시키는 데 있어1000 AMPK

서 보다 더 높은 효능을 나타내는 것처럼 보인다AICAR .

[0114] 는 골격 근육 조직에서 를 활성화시키는 것으로 알려졌다 AICAR p38 MAPK (Lemieux,

활성화는 에 의한 증가된 포도당 흡수와 관련 있음이 증명되었다 가이페2003). p38 AICAR .

도 5 도 6

[0074] 도 는 가이페노사이드를 세포에 처리한 시간에 따른 의 활성도 변화를 나타5 AMPK

낸 도면이다 미오튜브 세포에 가이페노사이드 를 처리하고 표시된 . L6 (myotube) (60 / )㎍ ㎖

시간만큼 배양하였다 이 세포를 용해 버퍼로 용해시킨 후 세포질 단백질을 에. SDS-PAGE

서 분리 후 단백질 밴드는 니트로셀룰로오스로 이동되었고 인산화 는 특이 항체로 , -AMPK

분석하였다 대조군 가이페노사이드 분 처리 가이페노사이드 시간 처리 . (1) (2) 30 (3) 1 (4)

가이페노사이드 시간 처리군2

[0075] 도 은 래트 평활근 세포에 고농도 포도당과 함께 가이페노사이드를 처리한 후 6

의 인산화 정도를 측정하였다 대조군 고농도 포도당 처리 고농도 AMPK . (1) (2) (27.5mM) (3)

포도당과 함께 가이페노사이드 처리 고농도 포도당과 함께 가이페노사이드(10 / ) (4) (30㎍ ㎖

처리/ ) ㎍ ㎖

- 54 -

노사이드가 세포에서 를 활성화시킬 수 있는지 여부를 조사하였다 의 L6 p38 MAPK . AICAR

처리는 정말로 의 활성화를 발휘하는 반면에 가이페노사이드는 의 활성을 거의 증가p38 , p38

시키지 않았다 도 상기 실시례에서 도 활성의 저해제인 는 가이페( 7). ( 4) p38 MAPK SB20358

노사이드에 의한 의 세포막으로 이동 증가를 억제하지 못함이 증명되었다GLUT4 . AMPK(GP>

및 에서 가이페노사이드와 간에 나타나는 다른 반응들AICAR) p38 MAPK(GP<AICAR) AICAR

을 고려하면 근육세포 의 이동을 활성화시키는 가이페노사이드의 분자적 기전은 , GLUT4

의 분자적 기전과 동일하지 않을 수도 있다AICAR .

실시례 가이페노사이드의 에 대한 효과[0115] 4. ACC

[0116] 는 다양한 조직 특히 간과 근육 조직에서 지질 대사를 조절하는 중요한 효소이다ACC , .

이 효소는 아세틸 코에이를 카복실화시켜 미토콘드리아 외부 막에 있는 의 활성을 저해- CPT-1

하는 말로닐 코에이 를 생성하게 한다 활성은 미토콘드리아 안에서 지방- (malonyl-CoA) . CPT-1

산 산화의 율속 단계 라고 알려졌다 는 키나아(rate-limiting step) (Lehninger, 2000). ACC AMPK

제 의 기질 단백질 중 하나이다 근육이 수축하면 근육세포는 지방산의 연(kinase) (Fryer, 2002). ,

소를 통해 더 많은 를 제공하기 위해서 활성을 촉진시킨다 그러므로 ATP AMPK (Vavvas, 1997).

활성에 의한 불활성화는 지방산을 감소시킬 수 있는 중요한 연구 목표점이 된다AMPK ACC .

[0117] 미요튜브 세포에 가이페노사이드와 를 처리하였다 가이페노사이드 처리는 L6 AICAR .

의 번째 세린 잔기를 인산화 하였다 도 인산화는 가이페노사이드에서 ACC 79 ( 8). ACC 60 /㎍ ㎖

최고치에 이르렀다 처리는 또한 의 인산화를 증가시켰지만 가이페노사. AICAR ACC , 30 /㎍ ㎖

이드 처리에서 관찰되는 인산화 정도보다는 약간 적게 나타났다 인슐린은 인산화에 영향을 .

미치지 않는다 이러한 결과는 근육세포에서의 가이페노사이드 처리는 분자수준에서의 근육 .

수축현상과 흡사하다는 것을 의미한다 인산화는 인슐린의 신호가 로 전달된. AKT(PKB) PI3K

다 근육세포에서의 가이페노사이드 처리가 활성에 영향을 미치는지 여부를 조사하였다. AKT

도 가이페노사이드 또는 모두 활성에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다( 8). AICAR AKT

도 7 도 8

- 55 -

도 양성 대조군인 인슐린은 의 활성을 상당히 증가시켰다 이 실험은 가이페노사이드( 8). AKT .

에 의해 자극된 의 이동 도 및 도 에 상술된 것처럼 이 인슐린 신호 전달방법과 관GLUT4 ( 3 4 )

련되지 않는 것으로 나타났고 오히려 근육 수축과정과 흡사하다.

실시례 가이페노사이드는 활성을 억제함으로써 근육세포에서 인슐린 저항성을 [0118] 5. IKK

감소시킨다.

[0120] 근육세포의 인슐린 저항성에서 대체로 번째 세린 잔기의 인산화가 발견된다IRS1 307 .

만을 처리한 것과 비교하여 지방산이 결합된 를 처리한 세포의 번째 세린 BSA , BSA IRS1 307

잔기의 인산화 정도가 약간 증가하였다 세포상에서 가이페노사이드 처리 시 . 60 / IRS1 ㎍ ㎖

번째 세린 잔기의 인산화 정도를 현저하게 감소시켰다 도 의 번째 세린 잔기 307 ( 9). IRS1 307

인산화의 감소는 인슐린 신호분자인 가 쪽으로 접근하기 용이하게 하여 세포가 인PI3K IRS1

슐린에 민감하게 한다 비록 가이페노사이드가 직접적으로 근육세포에의 인슐린 민감성을 증.

가시키지는 않지만 본 발명의 증거는 가이페노사이드가 근육세포에서의 인슐린 저항성을 감,

소시킬 수 있음을 의미한다.

[0125] 가이페노사이드를 수준으로 처리한 세포에서는 의 인산화에 영향을 미치10 / I-kB㎍ ㎖

지 않았으나 가이페노사이드를 수준으로 처리한 세포에서는 의 인산화가 현저, 30 / I-kB㎍ ㎖

하게 감소하였으며 이 실험 결과는 활성이 감소되었음을 의미한다 도 좌측 패널 또, IKK ( 11, ).

한 가이페노사이드를 처리한 세포의 핵 분획에서 의 함량이 현저하게 감소되30 / NF-kB㎍ ㎖

었다 도 우측 패널 이 실험 결과에서 인슐린 저항성이 유발된 세포를 가이페노사이드로 ( 11, ).

처리하면 의 활성을 억제함으로서 인슐린 저항성을 완화할 수 있음을 밝혀준다IKK .

[0126] 근육세포를 가이페노사이드 처리한 후 활성에 대한 영향에 대하여 실험하였L6 JNK

다 용량 의존적으로 가이페노사이드는 활성을 감소시켰다 도 또는 인슐린을 . - , JNK ( 12). AICAR

처리한 세포에서는 활성에 변화가 없었다 이 실험들의 결과를 종합해 보면 가이페노사JNK . ,

이드 처리는 인슐린 저항성의 중요한 생화학적 현상인 세린 잔기를 인산화하는 IRS IKKβ

의 활성을 억제하였음을 알 수 있다and JNK .

실시례 가이페노사이드 는 자극하여 포도당 흡수를 증가시킨다[0127] 6. (GP) AMPK .

[0130] 이타니 에 의해 보고된 바와 같이 고농도 포도당은 세포의 디옥시클루(Itani et al.) , L6

코스 유입에 영향을 미치지 않았다 도 가이페노사이드 및 인슐린 처리는 각각 ( 13). , AICAR

도 9 도 11 도 12

- 56 -

평균적으로 정도 데옥시글루코스의 세포 유입을 증가시켰다 이 실험은 가이24, 42, 40% 2- .

페노사이드가 근육세포 내로의 포도당 유입을 아마도 및 또는 활성에 의AMPK / p38 MARK

해서 증가할 수 있음을 나타낸다 이는 근육세포 내에서 가이페노사이드가 인슐린만큼 포도.

당 유입을 증가시키나 다른 기전을 통하여 작용함을 증명해준다, .

[0133] 상기 실시례들에서 가이페노사이드는 , AMPK

를 활성시키며 활성을 억제함으로써 가이페노ACC

사이드에 의해 산화를 증가시키는 환경을 조성함-β

을 암시하고 있다 간암 세포주 에 가이페노. HepG2

사이드를 처리하여 산화 속도가 증가하는지 여부-β

를 선행한 기술에 따라 수행하였다(Singh, 1994).

가이페노사이드를 처리한 세포는 처리하지 않은 대

조군에 비하여 라는 산화의 현저한 증가를 70% -β

나타냈다 도 실험 결과 가이페노사이드가 적정 ( 14). ,

조건하에서 체지방량을 줄일 수 있음을 확인하였다.

실시례 [0134] 7

[0135] 기능성 렙틴 수용체가 결여된 생쥐를 비만 고혈당 및 인슐린 저항성 모(leptin) db/db ,

델로 사용하였다 생쥐는 일반 사료 식이를 섭취하였다 가이페노사이드 및 양성 대조군으로 . .

사용된 글루코반스 임상 승인 의약품 를 명시된 비율로 일반 사료 식이와 미리 (Glucovance; )

섞어 제공하였다 식이는 임의로. (ad libitum 제공되었다 각 실험군은 생쥐 마리로 구성되) . 10

었고 적응기간 동안 채혈하여 혈당을 측정하였다 경구 투여를 주간 지속하였다 희생시키는 . 8 .

시점에서 글루코반스를 투여한 동물군은 처리하지 않은 그룹에 비해 평균 체중 감소를 , 22%

보였으며 가이페노사이드를 투여한 동물군은 체중 감소를 나타냈다 표 그룹 간 식이 , 12% ( 1).

섭취량에는 차이가 없었다 가이페노사이드를 투여한 동물군은 감소된 체중 증가를 보였다. .

도 14

표 [ 1]

- 57 -

선행발명 2. 2

Development of herbal medicine for anti-obesity:

TG1022, an activator of AMP-activated protein kinase reduces body fat mass

비만 및 당뇨모델을 이용한 비만억제 및 항당뇨 기능성 신물질의 개발

초록

(...)

활성 단백질 키나아제 활성화는 체질량 감소에 매우 중요하다 가 활성 AMP- (AMPK) . AMPK

화되면 아세틸 카복실화효소 가 비활성화되고 그에 따라 말로닐 생산이 줄어 -CoA (ACC) , -CoA

지방 합성은 감소하지만 산화는 증가시킨다 산화를 위해 지방산은 즉시 미토콘드리아로 - . -β β

이동되어야 한다 긴 사슬 지방산이 미토콘드리아 막을 통과하려면 카르니틴 셔틀이라는 운.

반 시스템이 필요하다 간과 근육에서 이 운반시스템은 말로닐 에 의해 억제된다 따라서 . -CoA .

활성화로 인한 말로닐 수치 감소는 미토콘드리아로의 지방산 운반을 자극하고 AMPK -CoA β

산화를 증가시키며 결과적으로 체지방량을 감소시킨다- .

우리는 식물 추출물인 가 근관세포에서 활성화를 자극한다는 것을 발견 TG1022 L6 AMPK

했다 로 유도된 높은 활성은 아세틸 카복실화효소 를 비활성화시켜 . TG1022 AMPK -CoA (ACC1)

미토콘드리아에서 산화를 촉진시킨다 여기서 우리는 비만 마우스와 인간 피험자의 - . (ob/ob) β

로 인한 체지방 및 체중 감소 효과에 관하여도 논의한다TG1022 .

- 58 -

선행발명 3. 5 돌외 사포닌 로부터 인삼사포닌 의 생산 “ Gypenoside V C-K ”–

서론. Ⅰ

고려인삼 은 대표적인 약용식물로 그 효능에 대한 다양한 (...) (Panax ginseng C.A Meyer)

연구가 보고된 바 있다 인삼의 주요 약리 성분 중 하나인 인삼 사포닌 은 . (ginsenoside)

계 의 구조를 가지고 있으며 다른 식물에서는 거의 찾아볼 수 triterpenoids dammarane type

없는 인삼의 특이적 성분으로 알려져 있다 최근 들어서는 약효가 더 뛰어난 것으로 알. (...)

려진 사포닌을 인삼의 사포닌의 변환을 통하여 얻어내는 것에 대한 연구가 활minor major

발히 진행 중이다 하지만 고가의 작물인 인삼으로부터 사포닌을 얻어 연구 및 산업에 이용.

하기에는 상당히 높은 비용을 필요로 한다는 단점이 있다 따라서 본 연구의 목적은 돌외.

(Gynostemma pentaphyllum 라는 식물로부터 인삼의 사포닌을 생산하는 데 있다 돌외는 한) .

약재명으로는 칠엽담으로 불리며 우리나라에 자생하는 덩굴성 초본류이다 특이하게도 돌외.

는 라고 불리는 인삼의 사포닌 성분과 같은 계 의 gypenoside triterpenoid dammarane type

사포닌을 다량으로 함유한 것으로 알려져 있다 그중에서도 진정 작용을 한다고 알려진. (Kita

계열이 인삼과 더불어 다량 함유되어 있다et al., 1981) protopanaxadiol(PPD) (Takemoto et

따라서 돌외에 존재하는 다양한 계열 사포닌 중 인삼의 사포닌으로 변환 가al., 1983). PPD

능성이 있는 돌외 사포닌을 선발한 후 이를 생물학적 전환 방법을 이용하여 돌외 사포닌을

분해하여 고기능성의 로 변환시키고자 하였다minor ginsenoside .

연구사. Ⅱ

돌외 1.

돌외 (Gynostemma pentaphyllum 는 박과 에 속하는 다년생 덩굴성 초본류) (Curcurbitaceae)

로서 예로부터 칠엽담 이라고 하여 주로 전초 또는 지상 부위(Blumert and Liu, 1999), ( )七葉膽

를 약용으로 이용해 왔다 돌외에는 다량의 사포닌 성분이 함유되어 있으며 지상부로부터 사.

포닌을 분리하여 이를 라고 명명한 것을 계기로 지금까지 약 여 종의 사포닌gypenoside 100

이 분리된 것으로 보고 되고 있으며 이러한 돌외의 사포닌은 돌외의 부위 생육환경(Table 1) , ,

수확시기 등에 따라 현저한 차이가 있는 것으로 알려져 있다(Valentina et al., 2005).

돌외 사포닌 2.

돌외 사포닌은 식물이 가진 배당체 성분으로 그 구조에 따라 다양하게 나뉜다 그중에서도 .

주로 인삼속 식물에 존재하는 사포닌은 다른 식물에서는 거의 triterpenoid dammarane type

함유되어 있지 않다고 알려져 있다 하지만 돌외는 라 불리는 . gypenoside triterpenoid

사포닌을 함유하고 있으며 그 종류는 여 종에 달한다 돌외 사포닌은 dammarane type 100 .

20(S)-dammar-24-ene-3b,19,20triol, 20(S)-dammar-24-ene-3b,12b,19,20tetrol, panaxatriol, 20(S)-

- 59 -

protopanaxadiol, 20(S)-dammar-24-ene-2a,3b,12b,20tetrol 등 다양한 을 함유하고 있는 aglycone

것으로 알려져 있다 그중 는 인삼 사포닌의 대표적인 (Cui et al., 1999). protopanaxadiol(PPD)

으로 등이 대표적인 계열 사포닌이다aglycone ginsenoside Rb1, Rb2, Rc, Rd, Rg3 PPD .

Fig. 1. Dammarane skeleton of G.penataphyllum with typical chains.

- 60 -

 

- 61 -

돌외 사포닌의 전환3.

사포닌은 구조적으로 당 부분과 비당 부분으로 나뉜다 인삼과 돌외 사포닌의 당 부분에는 .

등과 같은 당이 결합되어 있다 사포닌 전환에 관한 연구는 인삼glucose, rhamnose, xylose .

에서 분리한 를 중심으로 다양한 연구가 수행된 바 있다 특히 인삼의 사ginsenoside . minor

포닌의 높은 약리 효능이 보고되면서 인삼의 사포닌을 사포닌으로 전환에 관한 major minor

연구가 활발하게 진행 중이다 주로 인삼의 경우 크게 산 처리 열처리 효소처리 등을 통한 . , ,

사포닌 변환 연구가 진행되어 왔으며 최근에는 약산이나 저 농도의 산에 의한 가수분해가

많이 연구되고 있다 등 등 은 위산의 조건을 참조하여 인삼의 가수분해. Cai (2003), Han (1982)

에 관한 연구를 진행한 바 있고 등 은 또는 의 , Bae (2004) 0.1% 1% citric acid, acetic acid,

등을 이용하여 가수분해를 통해 사포닌 생산에 관한 연구를 수행한 바 있lactic acid minor

다 인삼 사포닌은 구조상으로 볼 때 이나 은 구조이고 은 . C-3 C-6 secondary carbon C-20

구조를 가졌기 때문에 이나 이 상대적으로 안정하여 의 당 가수분teriary carbon C-3 C-6 C-20

해가 상대적으로 활발히 일어나고 당의 가수분해뿐만 아니라 측쇄 부분의 산화나 고리화 반

응 등의 부반응을 통한 부산물이 생성되는 것으로 알려져 있다(Han et al., 1982; Miyamoto

열에 의한 사포닌 전환은 고온의 열처리 과정을 거치면서 당의 가수분해 반응et al., 1984).

- 62 -

에 의하여 사포닌이 생성된다 박minor (Kitagawa et al., 1983; Kwon et al., 2001; , 2002;

Park, 2004). (...)

돌외의 사포닌은 인삼과 매우 유사한 구조를 가지고 있기 때문에 인삼 사포닌과 마찬가지로

열처리 산 처리 효소처리 등을 통한 다양한 방법으로 전환이 가능하다, , .

Fig. 4. Transformation pathway of gypenoside V.

- 63 -

선행발명 4. 6 담마란계 화합물을 유효성분으로 포함하는 신장 보호용 약학 조성물 “ ”–

발명이 속하는 기술 및 그 분야의 종래기술

[0006] 담마란 화합물은 아래의 기본구조를 갖는 트리테르페노이드 화합물로 자연계에는 인

삼속 식물에 주로 존재하는 것으로 알려져 있다 담마란 화합물을 함유하고 있는 인삼속 식.

물은 고려인삼 화기삼 전칠삼 삼칠(Panax ginseng), (Panax quinquefolia), ( , Panax notoginseng),

죽절삼 삼엽삼 히말라야삼 베트남삼(Panax japonica), (Panax trifolia), (Panax pseudoginseng),

(Panax vietnamensis) 등이 있다 고려삼의 이해 고려인삼학회 ( , , p9, 1995; Advances in

고려인삼학회 담마란 화합물은 인삼속 식물의 특이성Ginseng Research, , pp127-137, 1998).

분이긴 하지만 인삼속이 아닌 돌외(Gynostemma pentaphyllum 에서 발견되기도 한 Makino)

다(Norberg A et al., J. Biol. Chem., 279(40), pp41361-41367, 2004).

[0009] 담마란 화합물은 가열과정 중 글리코실 잔기의 이탈에 의해 등 Rg2, Rg3, Rh2, Rh1

이 생성되며 이어서 번 위치에서 탈수반응이 일어나 가 생성된다20 Rg5, Rk1, Rh3, F4, Rh4

고려인삼 연구 년사 고려인삼학회 도 ( 20 , , p81-84, 1997). ( 1)

[0011] 현재까지 자연계에서 발견되는 담마란 화합물의 생리활성에 대한 다양한 연구가 진행

되어 왔다 또한 상기와 같은 방법으로 이러한 화합물의 구조를 변환시키고 변환된 담마란 . ,

화합물의 항산화작용 항암작용 혈액순환 개선작용 등 생리적 활성이 보고되어 있다, , . (...)

발명이 이루고자 하는 기술적 과제

[0015] 본 발명의 목적은 천연에는 존재하지 않는 담마란 화합물인 진세노사이드(ginsenoside)

진세노사이드Rk3, (ginsenoside) Rh4, PD(Panaxadiol), PT(Panaxatriol), PPD(protopanaxadiol),

PPT(protopanaxatriol), DHPPD(Dehydroprotopanaxadiol)- , DHPPD(dehydroprotopanaxadiol)-Ⅰ

또는 를 유효성분, DHPPT(Dehydroprotopanaxatriol)- , DHPPT(Dehydroprotopanaxatriol)-Ⅱ Ⅰ Ⅱ

으로 포함하는 신장 보호용 약학 조성물을 제공하는 것이다.

- 64 -

발명의 구성 및 작용

[0016] 본 발명은 하기 구조식 내지 으로 표기되는 진세노사이드 (1) (10) (ginsenoside) Rk3,

진세노사이드(ginsenoside) Rh4, PD(Panaxadiol), PT(Panaxatriol), PPD(protopanaxadiol), PPT

(protopanaxatriol), DHPPD(Dehydroprotopanaxadiol)-Ⅰ, DHPPD(dehydroprotopanaxadiol)-Ⅱ,

또는 를 유효성분으로 DHPPT(Dehydroprotopanaxatriol)- DHPPT(Dehydroprotopanaxatriol)-Ⅰ Ⅱ

함유하는 신장 보호용 약학 조성물을 제공한다.

- 65 -

[0027] 상기 화합물들은 모두 담마란 골격을 갖고 있으며 아직 자연계에서의 존재는 보고된

바 없으나 자연계에 존재하는 담마란 화합물을 이화학적으로 변형시켜 얻을 수 있다.

[0028] 상기 화합물은 고려인삼 화기삼 전칠삼 삼칠(Panax ginseng), (Panax quinquefolia), ( , Panax

죽절삼 삼엽삼 히말라야삼notoginseng), (Panax japonica), (Panax trifolia), (Panax pseudoginseng),

베트남삼 또는 돌외(Panax vietnamensis) (Gynostemma pentaphyllum Makino)에서 분리됨을 특

징으로 한다.

[0029] 상기 화합물은 상기 식물을 추출하여 담마란 화합물을 함유하고 있는 추출물 추출분 ,

획 부분 정제물 또는 이로부터 분리된 순수 화합물을 이화학적으로 처리하여 수득할 수 있, ,

고 이들 식물로부터 담마란 화합물을 추출하는 방법은 여러 문헌에 이미 보고가 되어 있으,

므로 이를 참조하여 추출 분획할 수 있다 고려인삼 연구 년사 고려인삼학회( 20 , , pp75-77,

1997; Norberg A et al., J. Biol. Chem., 279(40), pp41361-41367, 2004).

[0031] 상기 화합물은 인삼속 식물을 에서 시간 동안 가열하여 수득한 가공 80~200 0.5~20℃

인삼 추출물에서 분리됨을 특징으로 한다.

[0032] 이하 담마란 화합물을 수득하는 방법을 상세히 설명한다 , .

[0033] 담마란 화합물을 함유하고 있는 인삼속 식물 또는 돌외를 내지 바람직하게 50 200 , ℃

는 에서 분 내지 시간 바람직하게는 시간 동안 가열 가공한 후 저급 알코올 또120 30 10 , 3 , ℃

는 그들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매 바람직하게는 , CH3 을 넣고 환류 OH

추출하여 여과하는 조작을 회 이상 바람직하게는 회 실시하고 여액을 합해 감압농축하여 1 , 3

CH3 추출물을 수득하고 수득한 OH , CH3 추출물을 감압하에서 용매를 건조시키고 잔사를 OH

물에 현탁시켜 CH2Cl2과 수포화 을 차례로 사용하여 n-BuOH CH2Cl2 분획 분획 그 , n-BuOH

리고 H2 분획으로 나누었으며 각 분획을 감압하에서 증발 건조하여 각각 O , CH2Cl2 추출물 ,

추출물 그리고 n-BuOH H2 추출물을 수득한다O .

- 66 -

별지 [ 3]

22) Phi Hung Nguyen et al., “New dammarane-type glucosides as potential activators of AMP-activated protein
kinase (AMPK) from Gynostemma pentaphyllum”, Bioorganic & Medicinal Chemistry, 19(21), 2011,

쪽 특허권자가 공동저자로 이 사건 특허발명 실시례 과 실질적으로 동일한 내용이 개시되어 있다6258-6259 . , 1 .
23) Qian Wu, Moonhee Jang & Xiang-Lan Piao, “Determination by UPLC-MS of four dammarane-type

saponins from heat-processed Gynostemma pentaphyllum”, Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry,
쪽78(2), 2014, 315 .

갑 제 호증11 22)

활성화제의 추출 및 분리3.4. AMPK

말린 돌외잎 을 에탄올 로 시간 동안 두 번 추출한 후 차 및 차 상층액을 (5 ) 50% (8 ) 6 , 1 2㎏ ℓ

합치고 거즈로 여과하였고 분 동안 원심분리 하여 불용성 물질을 제거하였다, 30 (1500g) .

를 활성화시키는 화합물을 분리하기 위해 돌외의 에탄올 추출물을 이온 AMPK , 50% HP-20

교환 수지 칼럼 크로마토그래피 에 통과시켰다 각 분획은 물 메탄올 수(20×65 ) . (10 ), 50% ㎝ ℓ

용액 아세톤 으로 순차 용출하여 수집하였다 그다음 아세톤 분획을 건조하고 물(10 ), (10 ) . , (2 )ℓ ℓ ℓ

에 현탁시킨 후 헥산 에틸 아세테이트 부탄올 로 연속적으로 분배하였n- (3×2L), (3×2 ), n- (3×2 )ℓ ℓ

다 일부 부탄올 분획 을 실리카겔 칼럼 입자크기 크로마토그래피에 . (50g) (10×65 ; 63-200 ) ㎝ ㎛

CH2Cl2/MeOH/H2 의 구배 용매 시스템 부터 까지 을 사용해 통과시켜 개 분O (5/1/0.1 0/5/0.1 ) 5

획 을 얻었다 등용매 시스템 포름산이 포함된 메탄올을 사용하여 분(B.1-B.5) . (...) (0.1% 75% 45

간 분리 후 메탄올로 분 을 사용하는 100% 15 ) Gilson HPLC(Optima Pak C18 칼럼 , 10×250 , ㎜

입자크기 및 검출기 유속 로 분획 을 추가로 정10 ; 205 254 UV , 2 /min) B.34-5 (502 )㎛ ㎚ ㎖ ㎎

제하여 화합물 다물린 1( A, 18 , ㎎  분 및 다물린 =42 ) 2( B, 14 , ㎎  를 단리하였다=31.5min) .
갑 제 호증12, 19 23)

인용 주 열처리하지 않은 경우에도 다물린 가 존재하는 것이 확인됨 ( ) (No processing) A, B

- 67 -

24) Rehman Gauhar et al., “Heat-processed Gynostemma pentaphyllum extract improves obesity in ob/ob mice
by activating AMP-activated protein kinase”, Biotechnology Letters 쪽, 34, 2012, 1610-1611 .

갑 제 호증13 24)

돌외추출물의 다물린 피크 피크 수준은 오토클레이빙으로 시간 의존적으Fig. 1(b) A( A), B( B)

로 증가되었다 다물린 함량을 분석하기 위해 열처리된 돌외추출물 을 메탄올. A, B (2 ) 60% ㎎

에 용해시켜 로 분석하였다 가이페노사이드 은 각각 별표와 닫힌 삼각형으HPLC . XLVI, LXXVII

로 표시하였다

인용 주 오토클레이빙 처리 시간에도 피크 가 있으므로 단순 돌외추출물에 다물린 ( ) 0 A, B A,

가 존재함이 증명되고 처리시간에 따라 다물린 함량이 증가하는 것도 확인된다B , A, B .